CY3-肝素钠/CY3-Heparin sodium/Heparin Sodium-Cyanine3 conjugate/橙色荧光标记抗凝血多糖探针
CY3-肝素钠”(CY3-Heparin sodium)是一种将肝素钠(Heparin sodium)与荧光染料CY3(Cyanine 3)化学偶联而成的荧光标记多糖探针。它在细胞生物学、分子生物学和药理学研究中被广泛用于追踪肝素的分布、相互作用及其生物学功能。
肝素钠 (Heparin sodium):
是一种高度硫酸化的线性糖胺聚糖(Glycosaminoglycan, GAG),主要从动物组织(如猪肠黏膜)提取。
具有极强的负电荷,是临床上重要的抗凝血剂,通过增强抗凝血酶III(Antithrombin III)的活性来抑制凝血因子(如IIa、Xa)。
在体内还参与多种生物学过程,包括炎症调节、细胞增殖、血管生成、病毒入侵(如HSV、SARS-CoV-2)等,主要通过与多种带正电荷的蛋白质(如生长因子、细胞因子、粘附分子)结合来实现。
CY3 (Cyanine 3):
是一种合成的花青类荧光染料,激发波长约550 nm,发射波长约570 nm,发出亮橙红色荧光。
具有高消光系数和良好的量子产率,光稳定性优于FITC,是常用的荧光标记染料之一。
通常通过其活性衍生物(如CY3-NHS酯)与分子中的伯氨基(–NH₂)发生偶联反应。
由于天然肝素分子不含氨基(主要含羟基和磺酸/羧酸基团),直接标记较为困难。通常的策略包括:
引入连接臂:先通过化学修饰,在肝素分子上引入含有伯氨基的连接臂(spacer),例如使用乙二胺等双功能分子,通过还原胺化或其他反应将氨基引入肝素骨架。
荧光标记:再使用CY3-NHS酯与引入的伯氨基反应,形成稳定的酰胺键,从而实现CY3的共价标记。
最终产物 CY3-肝素钠 旨在:
保留肝素与靶蛋白结合的生物学活性,同时赋予其强而稳定的橙红色荧光信号,便于在细胞和分子水平上进行可视化研究。
蛋白质-多糖相互作用研究:
用于研究肝素与各种生长因子(如FGF-2、VEGF)、细胞因子、趋化因子或酶的结合。
可通过荧光共聚焦显微镜观察CY3-肝素在细胞表面的结合位点,或通过表面等离子共振(SPR)、荧光偏振(FP)等技术定量结合亲和力。
细胞表面受体/结合位点定位:
肝素可结合细胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPGs),后者是多种病原体(病毒、细菌毒素)和信号分子的共受体。
使用CY3-肝素钠可标记细胞表面的HSPGs分布,研究其在细胞粘附、信号转导或病原体入侵中的作用。
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