商品属性:

产品名称 | 转基因植物Bar基因检测试剂盒(荧光PCR法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P658 | 用途 | 仅供科研研究实验 |

1. 核心检测目标:Bar基因:

Bar基因的作用:Bar基因编码一种名为膦丝菌素乙酰转移酶 的蛋白质。这种酶能够使植物对草铵膦 类除草剂(如Basta、Liberty等)产生抗性。当喷洒草铵膦时,含有Bar基因的植物能够存活,而不含该基因的杂草则会被杀死。
应用作物:Bar基因被广泛导入多种转基因作物中,以实现除草剂抗性,例如:
转基因大豆、玉米、棉花、油菜
一些转基因水稻和小麦(在研发或试验阶段)
因此,检测Bar基因就等于检测了这些相关的转基因品系。
2. 核心技术原理:荧光PCR法:

荧光PCR法,也称为实时荧光定量PCR,是在传统PCR基础上加入了荧光染料或探针,从而能够实时监测扩增产物的积累。
工作流程如下:
DNA提取:从待测植物样品中提取纯化基因组DNA。
PCR反应体系配制:将提取的DNA、检测试剂盒中的引物、探针、PCR缓冲液、酶等混合。
引物:一对特异性短核苷酸序列,设计用于唯一性地识别并结合Bar基因的特定片段。
荧光探针:一条标记了报告荧光基团 和淬灭荧光基团 的特异性探针。当探针完整时,报告基团的荧光被淬灭基团抑制。当PCR扩增发生时,DNA聚合酶会水解探针,使报告基团游离并发出荧光。
实时荧光PCR扩增:
变性:高温使DNA双链解开。
退火:降温使引物和探针特异性地结合到目标Bar基因序列上。
延伸:中温下,DNA聚合酶沿着模板合成新的DNA链,并水解探针,释放荧光信号。
每完成一个循环,目标基因片段的数量就几乎翻倍,同时释放的荧光信号也相应增强。
信号检测与结果判读:
仪器实时监测每个反应管中的荧光强度。
当荧光信号超过预先设定的阈值 时,所经历的PCR循环数称为Ct值。
结果判读:
阳性:样品中含有Bar基因。PCR能够有效扩增,荧光信号会快速增长,并在一定循环数内(通常Ct值 < 35-40)超过阈值。
阴性:样品中不含有Bar基因。无特异性扩增,荧光信号始终不增长或增长极其缓慢,无法达到阈值(或无Ct值)。
3. 试剂盒的典型组成:

一个完整的试剂盒通常包含:
Bar基因检测液:含有针对Bar基因的特异性引物和探针的预混液。
阳性对照:含有已知浓度的Bar基因片段的质粒或DNA,用于验证实验是否成功。
阴性对照:不含Bar基因的植物DNA或纯水,用于排除污染和假阳性。
PCR反应缓冲液和DNA聚合酶。
使用说明书。
4. 主要特点与优势:

高灵敏度:可以检测出极微量的转基因成分,理论上即使只有一个拷贝的目标基因也能被检测到。
高特异性:引物和探针经过精心设计,只与Bar基因反应,避免了与其他基因的交叉反应。
快速高效:整个PCR过程通常在1.5-2小时内完成,适合高通量筛查。
定量能力:通过与已知浓度的标准品对比,该方法不仅可以进行定性检测(有/无),还能进行定量分析,计算出样品中转基因成分的百分含量,这对于许多国家的转基因标识法规至关重要。
闭管操作:PCR反应和检测在密闭的管中进行,大大降低了扩增产物污染的风险。
5. 主要应用领域:

食品安全与标识管理:检测食品、饲料及其原料中是否含有未经批准的转基因成分,或确保符合转基因标识阈值(如欧盟的0.9%)。
进出口检验检疫:在口岸对进口农产品进行强制性转基因筛查,确保符合本国法规。
种子纯度与真实性认证:确保非转基因种子不被污染,或验证转基因种子的真实性。
科学研究:在植物分子生物学和遗传改良研究中,用于鉴定转基因植株。
公司正在出售的产品:

附睾特异蛋白10抗体 | 非同位素HRP化学发光法DNA南方杂交试剂盒 |
中心体和纺锤体极相关蛋白1抗体 | 冰冻切片组织P35蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
丝氨酸/苏氨酸激酶TLK2抗体 | 8%蛋白电泳分离预制胶溶液 |
DHX8蛋白抗体 | 磷酸化粘着斑激酶抗体 |
组织甘肽(GLUTATHIONE)总浓度荧光定量检测试剂盒 | 肠型脂肪酸结合蛋白抗体 |
组织EPHB2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 嗅觉受体5K1抗体 |
蛋类羟丁酸待测样品处理试剂盒 | 2号染色体开放阅读框62抗体 |
细胞培养悬液氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒 | 卷曲螺旋结构域蛋白56抗体 |
细胞PIM1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | SMYD1蛋白抗体 |
芳族氨基酸脱羧酶(Aromatic Amino Acid Decarboxylase)活性 | G蛋白β4抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基4 |
1摩尔 HEPES pH7.2分子生物级溶液 | 转基因植物Bar基因检测试剂盒(荧光PCR法)石蜡切片组织INSULIN R-ALPHA 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2重组兔单克隆抗体 | JM109细菌 |
环指蛋白160抗体 | N聚糖酶多肽蛋白1抗体 |
注意事项:

防止污染:实验室必须严格分区(试剂准备区、样品处理区、扩增区),避免PCR产物的气溶胶污染导致假阳性。
内参照基因:一个完整的检测还必须包括一个植物内参照基因(如玉米IVR基因、大豆Lectin基因)的检测。这用于确认提取的DNA质量和数量是否合格,避免因DNA降解或提取失败而导致的假阴性。
仪器要求:需要专业的实时荧光定量PCR仪。
人员要求:操作人员需要经过专业培训,具备分子生物学实验技能。
关键字: 转基因植物Bar基因;检测试剂盒;荧光PCR法;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。