商品属性：
产品名称 | 转基因玉米品系T25检测试剂盒（PCR-荧光探针法） | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P660 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
一、检测背景与意义
T25品系特征
全球主要种植于美洲、亚洲部分地区，需符合各国转基因标识法规（如中国要求≥0.9%成分需标识）。
试剂盒用途
定性或定量检测玉米种子、叶片、加工产品（如淀粉、饲料）中的T25成分。
适用于海关检疫、食品安全监管及科研验证。
二、试剂盒核心原理
荧光PCR技术
特异性引物探针：靶向T25品系的特异序列（如pat基因或品系特异性边界序列）。
双重检测系统：
目标基因：T25品系标记基因（如35S启动子、pat基因）。
内参基因：玉米内源基因（如zein、hmg）确保DNA提取有效性。
荧光信号采集：探针标记FAM（目标基因）/HEX（内参基因），实时监测扩增曲线。
灵敏度与特异性
检测限通常为0.1%转基因成分，可区分T25与其他品系（如MON810、Bt11）。
三、操作流程（简化版）
步骤 关键操作要点
1. 样本制备 研磨玉米组织，采用CTAB法或商用试剂盒提取DNA，测定A260/A280（1.8-2.0为佳）。
2. 反应体系配制 按比例混合预混液、引物探针、模板DNA（建议20-50 ng/μL）。
3. qPCR扩增 程序：95℃预变性→（95℃ 15s→60℃ 1min）×40循环，采集荧光信号。
4. 结果分析 Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性；内参基因Ct值异常需复测。
四、注意事项与常见问题
质量控制
必须包含阴性对照（非转基因玉米DNA）和阳性对照（T25标准品）。
避免交叉污染（建议在超净台或PCR工作站操作）。
干扰因素
加工食品中DNA降解可能降低灵敏度，需优化提取方法。
高多糖多酚样本需额外纯化步骤。
法规符合性
不同国家对T25的监管阈值不同（欧盟0.9%，中国0%标识阈值），需根据当地标准调整检测方案。
五、应用场景扩展
供应链管理：验证种子纯度或原料非转基因承诺。
争议仲裁：针对标签错误或非法种植事件提供法律证据。
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关键字： 转基因玉米品系T25;检测试剂盒;PCR-荧光探针法;
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