猪细小病毒/伪狂犬野毒/圆环2型(PPV/PRV-gE/PCV-2)检测试剂盒(三重荧光PCR法)
检测目标与意义:
猪细小病毒(PPV):主要引起母猪的繁殖障碍,如流产、死胎、木乃伊胎等。早期快速诊断对于管理繁殖猪群至关重要。
伪狂犬病毒野毒(PRV-gE):
gE基因缺失是国内外广泛使用的伪狂犬病疫苗的标志。
通过检测gE糖蛋白基因,可以区分自然感染的野毒和接种的疫苗毒。这是实现伪狂犬病净化的核心技术。
猪圆环病毒2型(PCV-2):引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)等多种疾病,是导致免疫抑制和生长迟缓的主要病原之一。
开发意义:这三种病原均可导致严重的繁殖障碍或生长问题,临床症状有时难以区分。混合感染非常普遍且危害巨大。三联检测实现了“一管三检”,极大提高了诊断效率和精准度。
产品名称 | 猪细小病毒/伪狂犬野毒/圆环2型(PPV/PRV-gE/PCV-2)检测试剂盒(三重荧光PCR法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P723 | 用途 | 仅供科研研究实验 |

二、 核心原理:多重荧光PCR:
其核心技术是在常规荧光PCR的基础上,整合了“多重”和“多色”检测。
多重引物与探针:在一个PCR反应体系中,同时加入三套特异性引物和三条不同荧光标记的探针。
每条探针都针对其目标病原(PPV、PRV-gE、PCV-2)的特异基因序列。
每条探针的5‘端标记有发射波长互不干扰的报告荧光基团(如FAM、VIC/HEX、CY5对应三种不同病原)。
多通道荧光检测:荧光PCR仪配备多个光学检测通道。在PCR扩增过程中,仪器在每个循环结束后,会分别在不同的通道内检测各探针释放的荧光信号。
特异性识别:通过识别不同的荧光颜色,软件可以精确判断反应体系中存在哪一种或哪几种病原的核酸。
三、 主要优势:
与单重检测相比,三联检测的优势极其突出:
高效省时:一次检测即可完成对三种病原的筛查,将原本需要三次独立实验的工作合并为一次,检测通量提升三倍。
节省样本:对于珍贵或微量样本(如胚胎组织),只需一份核酸提取液即可完成多种病原检测。
成本效益:节省了试剂、耗材和人工成本。
排除干扰,精准诊断:能明确鉴定出混合感染,避免了因临床症状相似而导致的误判,为制定精准的防控方案提供直接依据。
完美适配净化程序:特别是对于PRV-gE的监测,可以高效地在种猪群中筛查出野毒感染个体,加速净化进程。
四、 典型操作流程:
流程与单重荧光PCR相似,但更注重多通道的设置:
样本采集与处理:采集可疑病猪的血清、组织(如流产胎儿、淋巴结、肺脏)、鼻拭子或精液等。
核酸提取:使用通用核酸提取试剂盒提取总核酸(DNA,因这三种均为DNA病毒)。
试剂配制:将提取的核酸、多重PCR反应液、以及包含三套引物和三条不同荧光标记探针的混合物,按比例加入同一PCR反应管中。
上机检测:
将反应管放入荧光PCR仪。
在仪器软件中,为每个荧光通道分别设定对应的检测目标(如:FAM通道 -> PPV, VIC通道 -> PRV-gE, CY5通道 -> PCV-2)。
运行预设的扩增程序。
结果分析:软件会自动分析各通道的荧光增长曲线和Ct值,并分别给出每个目标的检测结果。
五、 结果解读:
结果会为每一种病原提供独立的判读:
PPV阳性:FAM通道出现典型的S型扩增曲线,且Ct值小于设定阈值。
PRV-gE野毒阳性:VIC/HEX通道出现典型的S型扩增曲线,且Ct值小于设定阈值。(注意:此结果为野毒感染标志)
PCV-2阳性:CY5通道出现典型的S型扩增曲线,且Ct值小于设定阈值。
混合感染:两个或三个通道同时显示阳性结果。
阴性:所有通道均无扩增信号。
应用提示:Ct值不仅可以判断阴阳性,还能半定量反映病原载量。Ct值越小,表明该病原在样本中的初始含量越高。
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六、 应用场景:
这种高效的试剂盒特别适用于以下场景:
繁殖障碍性疾病的病因调查:快速排查是PPV、PRV还是混合感染所致。
伪狂犬病净化场监测:对种猪群进行大规模、高效率的野毒筛查。
引种检疫:对引进的后备猪进行多种重要病原的同步把关。
猪群健康状态评估:定期监测,了解PCV-2及其他病原的活跃度。
兽医诊断实验室:作为常规高通量检测服务,提升实验室的检测能力和效率。
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