商品属性：
产品名称 | 中华绒螯蟹呼肠孤病毒RNA检测试剂盒（恒温荧光法） | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P786 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
产品概述
中华绒螯蟹呼肠孤病毒检测试剂盒（恒温荧光法）是一种基于重组酶介导的等温扩增技术，用于快速、简便、高灵敏地检测中华绒螯蟹（大闸蟹）组织、血淋巴等样本中的呼肠孤病毒核酸。
该技术颠覆了传统的PCR需要热循环的过程，在恒定温度（通常为37-42℃） 下即可快速扩增目标核酸，并通过荧光信号进行实时监测，特别适用于基层实验室、养殖场现场或海关口岸的快速筛查。
二、 检测原理
其核心是RAA/RPA技术。
重组与酶切：
反应体系中含有重组酶、单链结合蛋白和聚合酶。
针对中华绒螯蟹呼肠孤病毒特异性基因序列设计的引物，在重组酶的作用下与模板DNA/RNA结合，形成引物-模板复合物。
随后，在聚合酶的作用下开始合成新的DNA链。
恒温扩增：
整个反应在一个恒定的温度（如39℃） 下进行，无需像PCR那样反复升降温。
荧光检测：
与荧光PCR类似，体系中包含一个特异性荧光探针。当探针与扩增产物结合并被切割时，会释放出可检测的荧光信号。
仪器实时监测荧光信号的强度，当信号超过预设阈值时，判为阳性。
对于RNA病毒的特殊处理： 由于呼肠孤病毒是RNA病毒，试剂盒通常包含一个逆转录步骤，将RNA逆转录为cDNA，然后进行RAA扩增。这个步骤通常也被优化在恒温条件下完成，或者与扩增步骤无缝衔接。
三、 试剂盒组成
一个典型的恒温荧光法试剂盒通常包含：
RAA反应干粉或预混液：包含重组酶、聚合酶、dNTPs、缓冲液等。
引物与探针混合物：针对中华绒螯蟹呼肠孤病毒的特异性引物和荧光探针。
阳性对照：含有病毒目标序列的质粒或RNA片段。
阴性对照：无核酸酶水。
反应缓冲液/启动液：用于启动反应的镁离子溶液等。
四、 技术特点与优势
与传统的荧光PCR法相比，恒温荧光法具有以下突出优势：
快速高效：整个扩增过程通常在10-30分钟内完成，远快于常规PCR（1-2小时）甚至部分快速荧光PCR。
设备简单，对场地要求低：仅需一个金属浴、水浴锅或便携式恒温荧光检测仪即可完成检测，无需昂贵、笨重的热循环仪。这极大地降低了使用门槛。
操作简便：省去了复杂的程序设置步骤，加样后放入恒温设备即可，非常适合非专业人员进行现场快速检测。
高灵敏度与特异性：灵敏度可与荧光PCR相媲美，甚至更高，并能有效区分其他病原。
强抗干扰能力：对样本中可能存在的PCR抑制物耐受性更强，粗提的核酸样本也可能获得良好结果。
五、 应用场景
养殖场现场诊断：当养殖场出现病蟹（如“水瘪子”病、肝胰腺发白、活力差、死亡等症状）时，可快速确诊是否为呼肠孤病毒感染，以便及时采取防控措施。
苗种检疫：对引进的蟹苗进行病毒筛查，防止带毒苗种进入养殖系统。
亲本筛查：筛选无病毒感染的亲蟹，从源头上控制病毒的垂直传播。
环境与流行病学监测：监测水体、饵料或不同养殖群体中的病毒携带情况，为流行病学研究提供数据。
海关与市场监管：用于进出口检验检疫和市场流通环节的快速抽检。
六、 操作流程详解说明
样本处理：取蟹的肝胰腺、鳃或血淋巴，进行简单匀浆。
核酸提取：使用快速的核酸提取试剂盒或核酸释放剂进行简单处理，无需高度纯化。
配制反应体系：将处理好的核酸样本、反应预混液、引物探针混合物和水加入反应管中。
启动与孵育：加入启动液（如Mg2?），混匀后立即放入恒温荧光检测仪或普通恒温设备（配合终点判读）。
结果判读：
实时判读：仪器实时显示荧光曲线，自动判读结果。
终点判读：反应结束后，通过仪器或肉眼在特定光源下观察荧光强度。
公司正在出售的产品：
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关键字： 中华绒螯蟹呼肠孤病毒RNA;检测试剂盒;恒温荧光法;
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