牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)检测试剂盒(荧光PCR法)
简介:
牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)检测试剂盒(荧光PCR法)是一种基于实时荧光定量PCR技术的分子诊断工具,
用于检测牛肺部病变组织和牛鼻拭子等标本中的牛呼吸道合胞体病毒RNA,适用于牛呼吸道合胞体病毒感染的辅助诊断。
检测原理与技术特点
该试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术,设计一对BRSV特异性引物和一条特异性荧光探针,通过一步法荧光RT-PCR技术对BRSV RNA进行体外扩增检测。
该方法具有高灵敏度、高特异性、操作简便、节省时间等特点,可避免后续污染,对标本的纯度要求较低。
试剂组成与规格
包装规格:50T/盒
样本采集与处理
组织样本:捕杀牛取肺部病变组织5g,称取约1g剪碎混匀后研磨,加入1.5mL生理盐水,8000rpm离心2min,取上清液
鼻拭子样本:活牛用灭菌棉拭子沾取鼻腔分泌物,置于含0.5mL生理盐水的离心管中,取100μL处理
保存运输:短期保存于-20℃,长期保存需-70℃,运输采用2~8℃冰袋,严禁反复冻融
具体步骤:
样品处理:组织样本剪碎研磨,离心取上清
核酸提取:推荐采用离心柱法提取RNA
试剂配制:根据样本总数计算所需PCR反应管数(样本数+阴性对照+阳性对照)
PCR扩增:设置荧光通道FAM,淬灭通道NONE,参比染料为None,执行40个循环程序
注意事项
实验需严格分区操作,使用带滤芯吸头和专用工作服
反应液应避光保存,试剂使用前需充分混匀
避免气泡产生,管盖需盖紧
实验完毕用10%次氯酸或75%酒精处理工作台
试剂盒所有物品应视为污染物对待,按生物安全规范处理
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关键字: 牛呼吸道合胞体病毒;检测试剂盒;荧光PCR法;
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