商品属性:

产品名称 | 猫衣原体(CP)检测试剂盒(荧光PCR法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1148 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |

一、 概述与临床意义

猫衣原体: 现更名为 猫衣原体 (Chlamydia felis)。它是一种专性细胞内寄生菌,主要感染猫的眼结膜和上呼吸道黏膜。
所致疾病: 引起猫衣原体病,特征为持续性结膜炎(眼睛发红、流泪、出现脓性分泌物)、打喷嚏、鼻分泌物增多等。幼猫和高密度饲养环境下的猫更易感。
检测价值:
高特异性: 能准确区分猫衣原体与其他引起类似症状的病原体,如猫疱疹病毒(FHV-1)、猫杯状病毒(FCV)等。
高灵敏度: 即使样本中病原体数量很少,也能检测出来,适用于早期感染或慢性携带者的诊断。
快速高效: 数小时内即可获得结果,远快于传统细胞培养法(需数天),便于兽医快速制定治疗方案(通常使用多西环素等抗生素)。
监测疗效: 可用于治疗后的复查,判断病原体是否被清除。
二、 检测原理

该试剂盒基于实时荧光PCR技术,通常采用TaqMan探针法。
靶基因选择: 设计针对猫衣原体种特异性基因序列的引物和探针,例如主要外膜蛋白基因或其他保守的特异性基因片段,确保检测的准确性。
样本采集与核酸提取:
采样: 使用无菌拭子采集猫的结膜分泌物或咽喉拭子。采样质量直接影响结果,应取到足够的细胞。
提取: 将拭子中的病原体DNA释放并纯化出来,去除样本中可能抑制PCR反应的物质。
PCR扩增与荧光信号产生:
将提取的DNA与反应液混合。反应液包含特异性引物、荧光探针(报告基团如FAM,淬灭基团)、DNA聚合酶等。
PCR循环过程中,探针与目标DNA结合后被DNA聚合酶水解,报告基团发出的荧光不再被淬灭。
实时监测: 仪器实时监测荧光信号的增强。信号强度超过设定阈值的循环数即为Ct值。
Ct值小:样本中猫衣原体DNA浓度高。
Ct值大或无Ct值:DNA浓度低或未检出。
三、 试剂盒主要组分

典型组分包括:
CP PCR反应液:包含缓冲液、dNTPs等。
酶混合物:热启动Taq酶。
猫衣原体阳性对照:含有CP的DNA片段,验证实验有效性。
阴性对照:无核酸水,监测污染。
内标:非常重要。用于监控每个样本的核酸提取是否成功及PCR反应有无抑制,有效防止假阴性。
四、 操作步骤(简要)

样本采集: 用专用拭子用力擦拭结膜穹窿或咽部,获取上皮细胞。
核酸提取: 将拭子头放入裂解液,按核酸提取试剂盒说明操作。
配制反应体系: 在无菌区,将各组分与模板DNA加入反应管。
上机扩增: 将反应管放入荧光PCR仪,运行预设程序(如:95°C预变性,然后40-45个循环的95°C变性、60°C退火延伸)。
结果分析: 软件自动分析扩增曲线和Ct值。
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关键字: 猫衣原体;提取试剂盒;荧光PCR法;
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