马尔堡病毒检测试剂盒
一、 产品概述：
马尔堡病毒（Marburg virus, MARV）与埃博拉病毒同属于丝状病毒科，是引起人类马尔堡病毒病（以前称为马尔堡出血热）的病原体。
该病病情严重，病死率高，是国际关注的重大公共卫生事件。
本试剂盒采用实时荧光逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术，用于定性检测人体血清、血浆或全血等样本中的马尔堡病毒特异性核酸。
该方法是目前早期、快速诊断马尔堡病毒感染的金标准方法之一，具有灵敏度极高、特异性强、检测速度快等特点，为疫情确认、患者隔离和治疗以及公共卫生应急响应提供关键依据。
重要警告： 所有涉及马尔堡病毒活病毒的操作必须在P4级生物安全实验室（BSL-4） 中进行。样本的灭活处理也需在适当等级的实验室（如BSL-3）内，按照严格规范完成，确保病毒完全失活后，才能进行后续的核酸提取和PCR检测。
产品名称 | 马尔堡病毒检测试剂盒 | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1166 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
二、 检测原理
马尔堡病毒的遗传物质是RNA，因此检测需要先将其逆转录为DNA再进行扩增。
样本灭活与核酸提取：
首先，采集的样本必须经过有效的灭活处理（如使用商业化病毒保存液，其中含有胍盐等灭活成分）。
然后，使用核酸提取试剂盒从灭活后的样本中提取总核酸（包括病毒RNA）。
逆转录（RT）：
在PCR反应的第一步，通过逆转录酶 将病毒RNA模板逆转录为互补的cDNA。
荧光PCR扩增与检测：
特异性引物：设计与马尔堡病毒高度保守、独特的基因区域（如NP核蛋白基因或GP糖蛋白基因）互补的引物，确保只扩增马尔堡病毒的核酸。
荧光探针：采用TaqMan探针法。探针一端标记报告荧光基团（如FAM），另一端标记淬灭荧光基团。当探针完整时，淬灭基团抑制报告基团发光。
实时检测：在PCR循环的退火/延伸阶段，引物和探针与cDNA模板结合。Taq DNA聚合酶在延伸DNA链时，其5‘→3’外切酶活性会降解探针，使报告基团与淬灭基团分离，从而发出荧光。每完成一次扩增循环，就释放一份荧光信号。
Ct值判定：实时荧光PCR仪监测每个反应管中荧光强度的变化。当荧光信号超过预设的阈值时，所对应的循环数称为Ct值。样本中病毒核酸的起始浓度越高，Ct值就越小（越早出现荧光信号）；浓度越低，Ct值就越大。
三、 试剂盒组成（以典型试剂盒为例）
PCR反应液：包含缓冲液、dNTPs、Mg2?等。
酶混合物：通常包含热启动Taq DNA聚合酶和逆转录酶，可能为混合酶形式。
马尔堡病毒阳性对照：含有灭活的马尔堡病毒核酸片段或人工合成的非感染性基因片段，用于监控整个检测过程的有效性。
阴性对照：无核酸酶水或已知不含马尔堡病毒核酸的样本基质，用于监测环境污染。
内标（Internal Control, IC）：高级试剂盒会包含内标，用于监控从核酸提取到PCR扩增的每一步是否成功，有效避免假阴性结果（例如，由于样本中存在PCR抑制物导致的扩增失败）。
四、 操作步骤（简要流程）
前提： 严格遵守生物安全规程，实验区域严格分区（试剂准备区、样本处理/核酸提取区、扩增及产物分析区），使用带滤芯的吸头。
样本灭活与处理：样本在BSL-3或BSL-4实验室完成灭活。
核酸提取：在样本处理区，使用商品化核酸提取试剂盒从灭活样本中提取RNA。将阳性对照和阴性对照同步进行提取。
反应体系配制：在试剂准备区，根据样本数配制主反应混合液（PCR反应液+酶混合物）。若含内标，通常在提取步骤前加入。
加样：将提取的RNA模板、阳性和阴性对照分别加入分装好反应液的PCR管中。
上机扩增：将反应管放入荧光PCR仪，设置循环程序。典型程序：
逆转录：50℃ 10-30分钟。
预变性：95℃ 2-5分钟。
PCR循环（40-45个循环）：95℃ 10-15秒（变性），55-60℃ 30-60秒（退火/延伸，在此阶段采集荧光信号）。
结果分析：运行结束后，仪器软件自动分析荧光增长曲线和Ct值。
公司正在出售的产品：
谷氨酰环化酶样蛋白抗体 | 细胞钾离子（K）浓度化学比色法定量检测试剂盒 |
转运蛋白SEC63抗体 | 细胞RHO 蛋白表达比色法定量检测试剂盒 |
碳酸酐酶12抗体 | 细胞培养液抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 |
F-box蛋白相关蛋白11抗体 | 氯离子通道KB抗体 |
组织半胱-5（CASPASE-5）活性荧光定量检测试剂盒 | 蛋白酪氨酸激酶9抗体 |
细胞组蛋白脱乙酰化酶1（HDAC1）活性比色法定量检测试剂盒 | 阳离子转运蛋白2抗体 |
细胞色素P450亚酶51（羊毛甾醇1，4α去甲基化酶）活性 | ADP核糖磷酸水解酶9抗体 |
细胞培养病毒污染溶斑法中性红染色试剂盒 | 磷酸化Rad51抗体 |
组织基质金属（MMP-9）活性比色法定量检测试剂盒 | X连锁脑特异性BPX蛋白抗体 |
细胞HSV（HERPES SIMPLX）病毒定性检测试剂盒 | L型钙通道蛋白a1亚型6抗体 |
随机引物DNA探针同位素（[α32P]dCTP）聚合酶标记试剂盒 | 马尔堡病毒检测试剂盒冰冻切片组织CASPASE-1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
AF488标记的程序性死亡配体1抗体 | 组织磷脂酶D（Phospholipase D）总活性比色法定量检测试剂盒 |
肌神经蛋白抗体 | RAB3A相关样蛋白1抗体 |
关键字： 马尔堡病毒;检测试剂盒;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域，利用互联网、数据分析及自动化技术，包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品，截止至2024年5月，西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景，西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力，更加重视本土化，建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活，能快速响应客户需求的产品。