商品属性:

产品名称 | 马传染性贫血(EIAV)检测试剂盒(荧光PCR法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1169 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
一、 核心概述:这是什么?用来做什么?

产品名称: 马传染性贫血病毒检测试剂盒(荧光PCR法)
检测目标: 马传染性贫血病毒(EIAV) 的特异性核酸(RNA)。
方法原理: 实时荧光逆转录PCR(RT-qPCR)。由于EIAV是RNA病毒,检测过程需要先将病毒的RNA逆转录为cDNA,再进行荧光PCR扩增和检测。
主要应用场景:
国境口岸检疫: 对进口马属动物进行强制性筛查,防止病原体传入。
养殖场净化与监测: 用于无疫区建设、种马场定期健康监测,以及扑杀阳性马后的效果评估。
疫情诊断与报告: 对出现可疑症状(如高热、贫血、消瘦)的马匹进行快速确诊。
国际贸易: 出具健康证明,满足进出口协议要求。
科学研究: 病毒流行病学调查、病原体遗传演化分析等。
二、 技术原理详解:荧光RT-PCR法如何工作?

样本采集与RNA提取:
样本类型: 主要采集抗凝全血(病毒存在于白细胞和血浆中)或组织样本。
逆转录: 使用逆转录酶,在特定温度下将病毒RNA基因组逆转录为更稳定的互补DNA(cDNA)。
RNA提取: 从样本中提取总RNA。此步骤要求极高,需防止RNA酶降解。
荧光PCR扩增与检测:
反应体系配制: 将上一步得到的cDNA与试剂盒内的以下成分混合:
PCR反应液: 含有针对EIAV特异性基因序列的引物和探针。探针通常标记有FAM等报告荧光基团。
内标: 优质试剂盒会包含一个内参系统,用于监控整个检测过程(从提取到扩增),有效避免假阴性。
实时荧光检测: 将反应管放入实时荧光PCR仪中运行程序。仪器在每一个循环结束后检测荧光信号的强度。
结果判读:
阳性结果: 在病毒检测通道(如FAM通道) 出现典型的S型扩增曲线,且Ct值低于说明书规定的阈值(如Ct < 40)。
阴性结果: 在病毒检测通道无扩增曲线或Ct值超过阈值。
有效性判断: 内标通道必须正常扩增,表明实验过程有效。如果内标无扩增,则本次检测无效。
三、 技术优势与特点

高特异性: 能准确检测出EIAV,与其他慢病毒区分开。
高灵敏度: 可检测出极低浓度的病毒核酸,有利于在感染“窗口期”或潜伏期做出早期诊断。
四、 重要注意事项与局限性

生物安全与RNA稳定性: 操作全血样本需注意生物安全。RNA极易降解,样本的储存、运输和处理必须在低温下快速进行,并使用RNA酶抑制剂。
严格防污染: 必须实行严格的PCR实验室分区管理,防止扩增产物的气溶胶污染。
结果解释的复杂性:
阳性结果: 表明动物体内存在EIAV核酸,是感染的确诊证据。
阴性结果: 如果内标正常,则很大程度上可以排除当前感染。
主要用于筛查和确诊: 该方法是直接检测病原体核酸的“金标准”之一。
不能替代抗体检测: 抗体检测仍是大规模筛查的常用方法。
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关键字: 马传染性贫血;检测试剂盒;荧光PCR法;
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