产品信息:

BT-483细胞是一种人乳腺导管癌细胞系,贴壁生长,形态为上皮细胞样,培养条件为37℃、5% CO₂,使用90%高糖DMEM或RPMI1640加10%FBS的培养基。
细胞特性
来源与形态
产品名称 | BT-483细胞 | 英文名称 | BT483:BT-483 |
货号 | AXB6157 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
形态:上皮细胞样
生长特性:贴壁生长,部分细胞可能呈悬浮状态
质量控制
支原体检测:阴性
生物安全等级:1级
培养条件
培养基配方
90%高糖DMEM+10%FBS 或 RPMI1640+10%FBS
也可使用MEM/F12+10%FBS
培养环境
温度:37℃
气体环境:5% CO₂,95% AIR
培养箱湿度:70%-80%
冻存条件
冻存液:培养基50%、血清40%、DMSO 10%
操作步骤
复苏操作
冻存管37℃水浴快速解冻
加入5mL培养基混合均匀,1000RPM离心3-5分钟
弃上清后用新鲜培养基重悬,接种至T25培养瓶
传代操作
细胞密度达80%-90%时进行传代
弃培养上清,PBS润洗1-2次
加0.25%胰酶-0.53mM EDTA,37℃消化1-2分钟
显微镜下观察细胞变圆并脱落时,加入完全培养基终止消化
轻轻吹打混匀,离心后按1:2-1:6比例分瓶
冻存操作
对数生长期细胞离心收集
用冻存液重悬,程序降温盒逐步降温后转入液氮
注意事项
收到细胞后先在培养箱稳定4小时再操作
贴壁细胞消化时严格控制时间,避免过度消化
可适当提高血清浓度(最高20%)优化生长条件
严格无菌操作,定期检测支原体
仅用于科研,不可用于临床治疗

培养操作要点:

基础培养基选择:分为天然培养基、合成培养基(如DMEM、RPMI 1640)和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置:
温度:多数人和哺乳动物细胞为36-37℃,昆虫细胞为27℃。
pH值:多数哺乳动物细胞为7.4,昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度:通常维持5-7% CO₂,多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压:控制在260-320mOsm/kg为宜。
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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运;以ATP为核心载体,通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能;通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导;原核细胞采用二分裂,真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖;细胞可进行程序性死亡(凋亡),并在多细胞生物中实现分化形成不同组织
关键字: BT-483;贴壁细胞;
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