Hep3B细胞
产品信息:

Hep3B细胞是人肝癌细胞系,常用于肝癌研究,特别是与乙型肝炎病毒(HBV)相关肝癌机制研究。以下是详细说明、培养操作和特性:
产品名称 | Hep3B细胞 | 英文名称 | Hep3B:Hep3B |
货号 | AXB6303 | 生长特性 | 贴壁生长 |
细胞特性
来源与背景:Hep3B细胞系建于1979年,源自一位7岁黑人男童的肝癌组织,整合了完整的乙型肝炎病毒(HBV)基因组,能产生甲胎蛋白(AFP)、乙肝表面抗原(HBsAg)等,具有广泛的研究价值。
形态与生长:上皮细胞样形态,贴壁生长,致瘤性强,在裸鼠中能形成肿瘤。
分子特征与应用:高表达AFP、HBsAg等肝癌相关蛋白,适合研究HBV与肝癌关系、肝癌分子机制、药物筛选(尤其是抗HBV药物)及基因治疗等。
培养条件
培养基与环境:推荐使用MEM或DMEM培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%双抗(青霉素/链霉素),37℃、5% CO₂培养箱中培养。
传代与冻存:传代比例1:2-1:4,每2-3天换液一次;冻存条件为90%FBS+10%DMSO,液氮长期保存。
培养操作
复苏:冻存管37℃水浴快速解冻,加入完全培养基离心(1000 rpm,3-5分钟),弃上清后重悬,接种于T25培养瓶,培养过夜。
传代:密度达80%-90%时进行。贴壁细胞:弃培养基,PBS润洗,加1 mL胰酶-EDTA消化1-2分钟,细胞变圆后加2 mL完全培养基终止,吹打混匀,离心(1000 rpm,3-5分钟),弃上清,用1-2 mL培养基重悬,按1:2至1:4分瓶,补足培养基继续培养。
冻存:生长良好时收集细胞,PBS清洗,加1 mL胰酶消化,制成悬液,1000 rpm离心4分钟,弃上清,加1 mL血清重悬,按细胞数量加入血清和DMSO(终浓度10%),分装冻存管(密度≥1×10⁶/mL),程序降温后-80℃保存2小时转入液氮。
优点与局限性
优点:整合HBV基因组,适合研究HBV相关肝癌;表达多种肝癌标志物,实验重复性好,适用于药物筛选和基因功能研究。
局限:作为单一细胞系,不能完全代表肝癌异质性;部分实验需结合体内模型验证。
注意事项:收到细胞后检查瓶体完整性及污染迹象,75%酒精消毒表面后置于37℃培养箱静置2-4小时稳定状态;首次传代建议保留原瓶培养基对比培养,运输用的培养基不可再用于细胞培养,需换用新配制的完全培养基。

基本操作步骤:

原代培养:取材→分离→培养,需保持材料新鲜及严格无菌2。
传代培养:贴壁细胞需胰酶消化,悬浮细胞可直接传代,离心后重悬分瓶23。
冻存与复苏:使用含10%DMSO的冻存液,程序降温后液氮保存;复苏时快速37℃水浴解冻。
具体特点如下:

环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
公司正在出售的产品:
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗豚鼠IgG 规格 0.1ml | Rhesus antibody Rh ZNF268 锌指脂蛋白抗体 规格 0.1ml |
bFGF-6(Human basic fibroblast growth factor 6) ELISA Kit 人碱性成纤维细胞生长因子6Multi-class antibodies规格: 48T | SA(Human Sialic acid) ELISA Kit 人唾液酸Multi-class antibodies规格: 48T |
Rhesus antibody Rh MLC3F/MYL1/3 肌球蛋白轻链1/3抗体 规格 0.2ml | Anti-RACK1 受体激活蛋白激酶C1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
Avidin/RBITC 罗丹明标记亲合素 0.1ml | Anti-KLK10/FITC 荧光素标记激肽释放酶10抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh GCDFP15 特异液体蛋白15抗体 规格 0.2ml | HBeAg(Mouse hepatitis B virus e antigen) ELISA Kit 小鼠e抗原Multi-class antibodies规格: 48T |
Anti-phospho-STAT3(pThr705)/FITC 荧光素标记抗0酸化信号转导和转录激活因子3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh GCDFP15 特异液体蛋白15抗体 规格 0.2ml |
Collagen V (Anti--Collagen Type V ) Ⅴ型胶原(多肽)Multi-class antibodies规格: 0.5mg | CCR-2 英文名称: 细胞表面趋化因子受体2抗体 0.1ml |
三0酸腺苷结合盒亚家族G1抗体 Anti-ABCG1 0.1ml | Anti-MIF /FITC 荧光素标记巨噬细胞移动抑制因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
C2orf65 英文名称: 2号染色体开放阅读框65抗体 0.2ml | Hep3B细胞BMP-6(Mouse Bone morphogenetic protein 6) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白6 |
RAB9 英文名称: ras癌基因家族Rab9蛋白抗体 0.1ml | Anti-MKP-2/DUSP4/FITC 荧光素标记原活化蛋白激酶0酸酶-2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
注意事项与应用:
无菌操作:必须严格无菌无毒,避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求:需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等,动物细胞还需血清。
抗生素使用:可添加双抗或三抗预防污染,但长期培养不建议持续使用,以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具,可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字: Hep3B;贴壁细胞;
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