MDCKII细胞
产品信息:

MDCK-II细胞是一种犬肾上皮样贴壁细胞系,亚型来自Madin-Darby犬肾细胞,培养条件为含10%-20%胎牛血清的DMEM或MEM基础培养基,37℃、5%CO₂饱和湿度环境;传代推荐1:2至1:3比例,当细胞密度达80%-90%时用0.25%胰酶-EDTA消化1-2分钟,终止离心后分瓶培养;冻存建议用含10%DMSO的血清冻存液程序降温至-80℃后转入液氮保存。
细胞基本说明
产品名称 | MDCKII细胞 | 英文名称 | MDCKII:MDCK II |
货号 | AXB6442 | 生长特性 | 贴壁生长 |
来源与形态:MDCK-II细胞源于犬肾组织,细胞形态呈上皮细胞样,贴壁生长;部分亚型如MDCK-II/RFP带红色荧光标记。
生长特性:贴壁依赖性生长,倍增时间约24-48小时,传代周期通常为2-3天,每周换液2-3次;密集培养时可见巨大空泡,属正常特性。
生物安全:生物安全等级为1级,支原体、细菌、酵母和真菌检测均为阴性,部分批次还通过HIV、乙型肝炎、丙型肝炎等病原体检查。
培养条件与操作步骤
复苏细胞
将冻存管在37℃水浴快速解冻(1-2分钟),酒精消毒后转移至离心管,加5-10mL预热完全培养基混匀,1000rpm离心3-5分钟,弃上清后用新鲜培养基重悬,接种T25瓶(5-7mL/瓶),次日换液并检查细胞密度。
细胞传代
贴壁细胞:弃培养上清,用不含钙镁离子的PBS润洗1-2次;加1-2mL 0.25%胰酶-EDTA消化液,37℃孵育1-2分钟,镜下观察细胞变圆并脱落,加5mL完全培养基终止消化,吹打均匀后1000rpm离心5分钟,弃上清用新鲜培养基重悬,按1:2至1:6比例分瓶(如两个T25瓶),补充5-8mL/瓶完全培养基。
悬浮细胞:收集细胞悬液,1000rpm离心5-10分钟,弃上清,补加1-2mL培养液重悬,按1:2至1:5分瓶或采用半数换液法。
细胞冻存
细胞生长状态良好时,弃培养基,PBS清洗一次;加适量胰酶消化(细胞变圆脱落),加完全培养基终止消化,离心(1000rpm,4-10分钟),弃上清;根据细胞数量加入无血清冻存液(如含10%DMSO),调整细胞密度至1×10⁶-1×10⁷/mL,分装冻存管,程序降温(如-80℃过夜)后转入液氮长期保存。
注意事项与售后条款
运输处理:收到细胞后用75%酒精擦拭瓶身,超净台内静置2-4小时;若瓶盖未松开需拧松,镜下检查污染及脱落细胞,运输中脱落的活细胞可离心富集后传代。
污染防控:严格无菌操作,若培养基浑浊或瓶身破损需立即联系供应商;售后条款通常要求48小时内提交污染证据(如台盼蓝染色照片),核实后重发。
使用限制:细胞仅用于科研,未经许可不得转让第三方;首次传代建议1:2分瓶,2-3天换液一次。

基本操作步骤:

原代培养:取材→分离→培养,需保持材料新鲜及严格无菌2。
传代培养:贴壁细胞需胰酶消化,悬浮细胞可直接传代,离心后重悬分瓶23。
冻存与复苏:使用含10%DMSO的冻存液,程序降温后液氮保存;复苏时快速37℃水浴解冻。
具体特点如下:

环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
公司正在出售的产品:
Anti-GRM5/FITC 荧光素标记代谢型谷氨酸受体5抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh MRP5/ABCC5 多药耐药相关蛋白5抗体 规格 0.1ml |
NR3B 英文名称: 谷酸受体3B抗体 0.2ml | RFX4 英文名称: 转录调控因子RFX4抗体 0.2ml |
Anti-Urocortin 新型活性因子UCN抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | AQP3(aquaporin 3) 水通道蛋白-3抗原 0.5mg |
MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相关糖蛋白a/b(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg | phospho-Cortactin (Tyr466) 英文名称: 0酸化皮层肌动蛋白抗体 0.1ml |
Anti-phospho-HDAC8(Ser39) 0酸化组蛋白去乙酰化酶8抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | NIPP1 英文名称: 核抑制蛋酸酶1抗体 0.2ml |
Rhesus antibody Rh RING1 环指蛋白1抗体 规格 0.2ml | Anti-phospho-HDAC8(Ser39) 0酸化组蛋白去乙酰化酶8抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser315) 0酸化抑制基因P53抗体 规格 0.1ml | Rhesus antibody Rh Cathepsin K 组织蛋白酶K抗体 规格 0.1ml |
Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)/FITC 荧光素标记0酸化血小板源性生长因子受体-B抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | CD8 大鼠CD8分子 |
Rhesus antibody Rh MT-ND6 NADH复合体6抗体 规格 0.1ml | MDCKII细胞THAA(Human thyroid hormone autoantibodies) ELISA Kit 人甲状腺非肽激素抗体Multi-class antibodies规格: 48T |
Anti-PTP/PTPase/CD148 蛋白酪氨酸0酸酶CD148抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | CD177/NB1 peptide 嗜中性粒细胞抗原CD177抗原 0.5mg |
注意事项与应用:
无菌操作:必须严格无菌无毒,避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求:需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等,动物细胞还需血清。
抗生素使用:可添加双抗或三抗预防污染,但长期培养不建议持续使用,以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具,可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字: MDCKII;贴壁细胞;
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