高致病性禽流感H7亚型病毒检测试剂盒(荧光PCR法)
试剂简介：
高致病性禽流感H7亚型病毒检测试剂盒（荧光PCR法）是一种用于快速、准确检测禽流感H7亚型病毒的分子诊断工具。以下是该试剂盒的详解说明及操作特点：
产品名称 | 高致病性禽流感H7亚型病毒检测试剂盒(荧光PCR法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1378 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
检测原理
基于实时荧光定量PCR技术，利用特异性引物和TaqMan探针靶向扩增H7亚型禽流感病毒基因组中的保守区域（如血凝素基因HA）。
在PCR扩增过程中，探针与目标序列结合并被Taq酶降解，释放荧光信号。通过实时监测荧光强度变化，实现对H7亚型病毒核酸的高灵敏度和高特异性检测。
试剂盒组成
PCR反应液：含缓冲液、dNTPs、Mg2?等基础成分
热启动DNA聚合酶：用于DNA扩增
特异性引物和探针：针对H7亚型禽流感病毒保守基因区域设计，探针带荧光报告基团（如FAM）和淬灭基团（如TAMRA）
阳性对照：含已知浓度的H7亚型病毒RNA
阴性对照：无菌去离子水或不含病毒RNA的样本
RNA提取试剂：用于从样本中提取病毒RNA
操作步骤
样本采集与处理：采集禽类咽喉拭子、泄殖腔拭子、组织样本等，进行预处理。
核酸提取：使用试剂盒提供的提取试剂或自动化核酸提取仪，从样本中提取病毒RNA。
反应体系配置：在冰浴中混合PCR反应液、引物/探针、模板RNA，并设置阳性和阴性对照。
荧光PCR扩增：将反应体系置于荧光定量PCR仪中，执行扩增程序（如50℃逆转录30分钟，95℃预变性5分钟，40个循环：95℃ 15秒、60℃ 1分钟），实时监测荧光信号。
结果分析：根据Ct值和扩增曲线判定结果（如Ct≤35为阳性，Ct≥40为阴性）。
操作特点
高灵敏度与特异性：可检测低至10拷贝的病毒核酸，有效避免假阴性；特异性引物和探针设计，避免与其他病毒交叉反应。
快速便捷：全程检测时间2-4小时，适配自动化核酸提取仪和荧光PCR仪，支持高通量检测。
封闭式检测：减少污染风险，操作需在生物安全柜中进行。
注意事项
严格遵守实验室生物安全规范，避免交叉污染。
试剂需-20℃避光保存，避免反复冻融；操作时佩戴手套、实验服等防护装备。
结果判读需结合临床症状和其他检测结果进行综合评估。
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