产品信息:

产品名称 | A549/Tax(人肺腺癌紫杉醇耐药性细胞) | 英文名称 | A549/Tax:A549Tax |
货号 | AXB10498 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
来源与背景

由人肺腺癌细胞A549经紫杉醇(Taxol)梯度诱导筛选获得,属上皮细胞样贴壁细胞。
关键特征:
对紫杉醇的耐药性较亲本细胞提升800倍(IC50值显著升高)。
微生物及支原体检测为阴性(供应商质控)。
应用领域:肺癌耐药机制研究、化疗药物筛选及纳米制剂疗效评估。
形态与生长特性
倍增时间:约18-37小时(37℃条件下)。
培养条件:37℃、5% CO?,饱和湿度。
二、培养操作流程

培养基与试剂
基础培养基:Ham's F-12K(推荐)或DMEM/F12。
添加成分:
10%胎牛血清(FBS)
1%青霉素-链霉素(P/S)
紫杉醇(Taxol):0.5-1 μg/mL(维持耐药性)。
消化液:0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA。
冻存液:55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO。
传代培养(贴壁细胞)
消化监控:
细胞汇合度达80%-90%时操作。
弃旧培养基,PBS洗涤1次,加入胰酶(T25瓶1 mL),37℃消化1-2分钟。
关键点:镜下观察细胞变圆、间隙增大即终止消化。
终止与离心:
加入2倍体积完全培养基终止消化,轻柔吹打制成单细胞悬液。
1000 rpm离心4分钟,弃上清。
重悬与分瓶:
用1-2 mL完全培养基重悬,按 1:2至1:3比例 分瓶。
补充新鲜培养基至T25瓶6-8 mL,37℃、5% CO?培养箱培养。
冻存与复苏
冻存:
收集对数生长期细胞,密度调至≥1×10? cells/mL,程序性冻存(-80℃过夜→液氮)。
复苏:
37℃水浴快速解冻,转移至含4 mL预温培养基的离心管。
1000 rpm离心4分钟,重悬接种至T25瓶,次日换液。
三、关键注意事项

耐药性维持
培养基中需持续添加紫杉醇(0.5-1 μg/mL),否则可能丢失耐药性。
复苏后细胞需逐步适应含药培养基(梯度加药)。
污染防控
收货后立即检查培养瓶是否破损、细胞是否污染,48小时内确认支原体状态。
操作全程无菌,培养箱定期消毒。
特殊处理
运输后脱落细胞:若细胞大量脱落,可离心收集上清液,胰酶轻柔消化后重悬。
细胞状态监控:低倍镜(4×)判断汇合度,高倍镜(10×)观察形态。
科研应用:
肺癌耐药机制研究(如ABCG2基因功能验证)。
紫杉醇纳米制剂(如S-LDHs)疗效评估。
公司正在出售的产品:
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关键字: A549/Tax;人肺腺癌紫杉醇耐药性细胞;贴壁细胞;
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