线粒体呼吸链复合体Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶测定试剂盒/微量法/48样 新品

线粒体呼吸链复合体Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶测定试剂盒/微量法

测定意义：

线粒体复合体Ⅴ又称F1F0-ATP合酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，由F1和F0两个亚单位组成。该酶利用呼吸链产生的质子电化学梯度催化ATP合成，也可逆过程水解ATP。此外，复合体Ⅴ还存在于叶绿体、异养菌和光合细菌中。复合体Ⅴ是线粒体氧化磷酸化和叶绿体光合磷酸化合成ATP的关键酶。

测定原理：

复合体Ⅴ水解 ATP 产生 ADP 和 Pi ，通过测定 Pi 增加速率来测定复合体Ⅴ活性。

自备仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：

1、酶促反应（在 EP 管中加入下列试剂）

                                            混匀， 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）准确水浴30min

                           混匀，4000g ，25℃离心 10min，取上清液2、定磷(在 EP 管或 96 孔板中加入下列试剂）

混匀，室温静置 10min 后，在 660nm 处读取 A 测定管和 A 对照管，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。

注 意：

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。