人白血病细胞;BV-173
产品信息:

产品名称 | 人白血病细胞;BV-173 | 英文名称 | BV-173:BV173 |
货号 | AXB10429 | 生长特性 | 悬浮生长 |
建立于1980年,源自一名45岁慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血,由德国资源中心(DSMZ)保藏。
分子特征:携带t(9;22)染色体易位,表达BCR-ABL1 e13-a2(b2-a2)融合基因,是靶向药物研究的重要模型。
应用领域:
白血病发病机制研究
酪氨酸激酶抑制剂(如伊马替尼)敏感性测试
形态与生长
生长特性:严格悬浮生长,不贴壁,需定期摇匀。
倍增时间:每周2-3次(37℃条件下)。
二、培养操作指南

培养体系与条件
基础培养基 RPMI 1640(含L-谷氨酰胺)
添加成分 10%胎牛血清(FBS) + 1%青霉素-链霉素(P/S)
培养环境 温度:37℃ ;
气相:空气95% + CO? 5%
传代比例 1:2至1:3(直接离心传代)
冻存条件 90% FBS + 10% DMSO,液氮储存
操作步骤

复苏
37℃水浴快速解冻冻存管,加入5 mL完全培养基混匀,离心(1000 RPM,5分钟)后重悬接种。
关键点:次日换液去除死细胞,培养瓶需密闭盖防止污染。
传代
直接离心(1000 RPM,8-10分钟)收集细胞,重悬后按比例分瓶。
注意事项:
避免过度离心(损伤细胞膜) ;
操作全程需轻柔,防止气泡机械损伤。
冻存
汇合度80%时收集细胞,离心后用冻存液重悬,程序降温(-1℃/min)至-80℃后转入液氮。
三、关键注意事项

污染防控
定期检测支原体(推荐PCR法),避免真菌污染(培养基中可添加两性霉素B)。
培养细节
活率监控:台盼蓝染色法每日检测活率(活率<90%需优化培养条件)。
药物处理:BCR-ABL1抑制剂(如伊马替尼)处理浓度建议0.1-1 μM。
实验应用
细胞凋亡检测:Annexin V/PI双染法(处理后24-48小时)。
基因表达分析:推荐使用TRIzol法提取RNA(细胞裂解需彻底)。
四、常见问题与解决方案

问题 原因 解决方案
细胞结团 吹打力度不足或血清批次差异 轻柔吹打+预热培养基
生长缓慢 血清质量或密度过高 更换优质FBS,密度控制在5×10? cells/mL
BCR-ABL1表达下降 培养超过10天或冻存损伤 早期冻存(P3-P5代),避免长期传代
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关键字: BV-173;人白血病细胞;贴壁细胞;
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