产品信息:

来源与背景
源自一名59岁男性食管中段鳞状细胞癌组织(侵袭深度不超过粘膜下层),由日本学者建立。
分子特征:携带p53突变及MYC癌基因扩增,具备高度代表性。
产品名称 | 人食管鳞癌细胞;KYSE-450 | 英文名称 | KYSE-450:KYSE450 |
货号 | AXB10437 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
应用领域:

食管癌发生机制(如癌基因突变、表观遗传调控)
药物敏感性检测(如化疗/靶向药物筛选)
信号通路研究(PI3K/AKT、MAPK、Notch通路)
形态与生长
形态:上皮细胞样,呈不规则多边形或长梭形。
生长特性:贴壁生长为主,部分悬浮细胞需离心收集。
倍增时间:约2-3天(37℃条件下)。
二、培养操作指南

培养体系与条件
基础培养基 高糖DMEM或MEM/F12
添加成分 10%胎牛血清(FBS)
培养环境 温度:37℃ ;
气相:空气95% + CO? 5%
传代比例 1:2至1:3(贴壁细胞需胰酶消化)
冻存条件 50%培养基 + 40% FBS + 10% DMSO,液氮储存
操作步骤

复苏
37℃水浴快速解冻,离心(1000 RPM,5分钟)去除冻存液,重悬于预热培养基,T25瓶培养过夜。
关键点:次日换液去除死细胞,连续观察2-3天。
传代
PBS清洗后,加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分钟(细胞变圆即终止),加完全培养基终止消化。
注意事项:
消化时间需严格控制(过度消化损伤细胞);
悬浮细胞可直接离心传代(1000 RPM,5分钟)。
冻存
汇合度80%时消化,离心后用冻存液重悬,程序降温(-1℃/min)至-80℃后转入液氮。
三、关键注意事项

污染防控
定期检测支原体(推荐PCR法),避免交叉污染。
培养细节
贴壁问题:若运输后细胞脱落,可离心收集(1000 RPM,5分钟)后重新接种。
血清浓度:初始培养可提高至15% FBS促进贴壁,稳定后恢复10%。
实验应用
药物敏感性检测:推荐CCK-8或MTT法(接种密度5×103 cells/孔)。
基因编辑:CRISPR-Cas9转染效率较高(建议使用脂质体试剂)。
四、常见问题与解决方案

问题 原因 解决方案
细胞消化过度 胰酶作用时间过长 缩短至1分钟内,及时终止消化
生长不均(岛状) 细胞团块未吹散 消化后轻柔吹打均匀
悬浮细胞增多 消化不足或贴壁能力下降 优化胰酶浓度,离心收集悬浮细胞
公司正在出售的产品:
Anti-Nm23/FITC 荧光素标记转移抑制基因抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | ADCY9 英文名称: 腺苷酸环化酶9抗体 0.2ml |
ETNK2 英文名称: 乙激酶2抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-pig IgG/FITC FITC标记的兔抗猪IgG 规格 0.3ml |
phospho-IKK beta(S474) 英文名称: 0酸化KB抑制蛋白激酶β抗体 0.1ml | NAT8L 英文名称: N-乙酰转移酶8样蛋白抗体 0.2ml |
NOS ELISA Kit 大鼠合成酶Multi-class antibodies规格: 48T | Anti-Phospho-MK1/2 (Ser217/221) 0酸化原活化蛋白激酶激酶1/2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
GP210(Mouse Anti-glucoprotein 210)ELISA Kit 小鼠抗核膜糖蛋白210抗体Multi-class antibodies规格: 48T | Anti-HIF-1 Beta/ARNT1/FITC 荧光素标记缺氧诱导因子1β 抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
ABP(Human Androgen Binding Protein) ELISA Kit 人雄激素结合蛋白 | 5HT5A receptor 英文名称: 5-羟色胺受体5A抗体 0.2ml |
单抗 单抗Multi-class antibodies规格: | Rhesus antibody Rh RAD21 核基质蛋白21抗体 规格 0.2ml |
Anti-VPS18 空泡分选蛋白18抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-Phospho-Btk(Tyr223) 0酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
phospho-MEK1 (Thr286) 英文名称: 0酸化原活化蛋白激酶激酶1抗体 0.1ml | 人食管鳞癌细胞;KYSE-450THAP2 英文名称: THAP2蛋白抗体 0.1ml |
Anti-GLUT2/FITC 荧光素标记葡萄糖转运蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-CCL24/Eotaxin-2 嗜酸粒细胞趋化蛋白24抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
细胞类型与特性

原代细胞:直接从组织中分离的细胞,通常指第1-10代细胞,具有接近体内状态的特性。
细胞系:原代细胞首次传代成功后形成的细胞群,可连续传代。
细胞株:从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞,通常为第10-50代。
根据生长方式分为:
贴壁细胞:需附着在培养瓶表面生长,如成纤维细胞、上皮细胞。
悬浮细胞:在培养基中自由悬浮生长,如血液细胞。
半贴壁半悬浮细胞:兼具贴壁和悬浮生长特性。
关键字: KYSE-450;人食管鳞癌细胞;贴壁细胞;
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