商品属性：
检测目标
广谱检测**肠道病毒属（Enterovirus, EV）**的RNA，包括：
脊髓灰质炎病毒（PV）、柯萨奇病毒（CV-A/B）、埃可病毒（Echovirus）、EV-D68等。
含内标（Internal Control, IC）：监控样本采集、提取及扩增全过程，避免假阴性。
产品名称 | 肠道病毒通用型检测试剂盒 / 含内标 | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1531 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
方法原理
实时荧光RT-PCR：针对肠道病毒5'-UTR保守区设计引物探针，同步逆转录（RT）与扩增（PCR），通过荧光信号定性检测。
适用样本
粪便、肛拭子、咽拭子、脑脊液（CSF）、血清及环境样本（污水）。
二、试剂盒组成
组分 作用说明
RT-PCR预混液 含逆转录酶、Taq酶、dNTPs、缓冲液（优化抑制物耐受性）。
引物探针混合液 肠道病毒通用引物（如EV-U1/EV-U2）及探针（FAM标记），内标引物（HEX标记）。
内标（IC） 人工合成RNA片段，全程监控提取与扩增效率。
阳性对照 灭活肠道病毒（如CV-B5）RNA。
阴性对照 无核酸水。
三、操作流程
样本处理
RNA提取：推荐磁珠法或柱提法，粪便样本需匀浆离心去杂质。
内标添加：提取前加入IC（或试剂盒预包被），确保提取有效性。
RT-PCR扩增
反应体系（20μL示例）：
组分 体积（μL）
RT-PCR预混液 15
引物探针混合液 3
模板RNA 2
程序设置（两步法）：
逆转录：50℃ 15分钟 → 预变性：95℃ 3分钟 → 循环：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环）。
结果判读
肠道病毒阳性：FAM通道Ct值≤35，且扩增曲线呈S型。
内标有效性：HEX通道Ct值≤30（若无效，需重复检测）。
阴性：FAM无扩增且内标正常。
四、性能参数
指标 参数要求
灵敏度 ≤50拷贝/反应（纯RNA）
特异性 不与鼻病毒、甲肝病毒等交叉反应
检出限 102-103病毒颗粒/g（粪便样本）
抗干扰性 耐受10%血液或胆汁抑制物
五、注意事项
质量控制
每批检测需包含阴阳性对照，内标失效时需排查原因（如提取失败或PCR抑制）。
样本保存
RNA易降解，采集后-80℃保存（避免反复冻融）。
生物安全
高风险样本（如CSF）需在BSL-2实验室操作。
六、应用场景
临床诊断：快速筛查手足口病（HFMD）、无菌性脑膜炎等。
疫情防控：监测EV-D68等新兴毒株的暴发。
疫苗评估：脊髓灰质炎灭活疫苗（IPV）接种后病毒排泄监测。
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关键字： 肠道病毒通用型;检测试剂盒;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
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