商品属性：
产品名称 | 肠道病毒通用 / 人博卡病毒检测试剂盒( 双重荧光 PCR 法 ) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1533 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
检测目标：
肠道病毒通用型（EV）：包括柯萨奇病毒（CV）、埃可病毒（ECHO）等，靶向5'-UTR保守区。
人博卡病毒（HBoV）：靶向NS1基因（分型1-4，以HBoV1为主）。
方法原理：双重荧光PCR（FAM通道检测EV，HEX/VIC通道检测HBoV），同步扩增避免交叉污染。
适用样本：粪便（首选）、咽拭子、脑脊液（EV相关脑膜炎）。
2. 检测流程
样本处理
粪便：取0.1 g加1 mL PBS匀浆，离心取上清（避免颗粒物干扰）。
咽拭子：置于病毒保存液（如UTM）中震荡洗脱。
核酸提取
推荐磁珠法（如Qiagen Viral RNA Mini Kit），同步提取DNA/RNA（EV为RNA病毒，HBoV为DNA病毒）。
PCR扩增
反应体系：
EV引物探针：靶向5'-UTR（FAM标记）。
HBoV引物探针：靶向NS1（HEX标记）。
内参：RNase P（CY5通道，监控提取效率）。
循环程序：95℃ 3min →（95℃ 15s → 60℃ 45s）×45循环。
结果判读
阳性：Ct≤35（FAM/HEX），且内参Ct≤30。
阴性：无扩增曲线或Ct≥38。
3. 性能参数
指标 EV参数
灵敏度 ≤50 copies/反应
特异性 不与鼻病毒交叉
检出限 10^2 copies/g粪便
抗干扰性 耐受10%黏液或胆汁盐
4. 注意事项
假阴性风险：
EV易降解，RNA需立即提取或保存于-80℃。
HBoV低载量时（<10^3 copies/mL）建议重复检测。
生物安全：EV属BSL-2病原体，操作需在生物安全柜中进行。
质控要求：每批次需包含：
阴性对照（无核酸水）。
阳性对照（含EV/HBoV混合质粒）。
5. 应用场景
临床诊断：
EV：手足口病（CV-A16/EV71）、无菌性脑膜炎。
HBoV：儿童急性呼吸道感染（尤其合并喘息）。
公共卫生：托幼机构聚集性疫情快速筛查。
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关键字： 肠道病毒通用;检测试剂盒;双重荧光 PCR 法;
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