商品属性：
产品名称
肠道病毒 71 型 / 柯萨奇病毒 A16 型检测试剂盒( 双重荧光 PCR 法 )
检测方法
荧光PCR法
货号
XG-P1538
应用范围
核酸的定性检测
规格
50T
用途
仅供科研研究实验
检测目标
EV71型肠道病毒：手足口病主要病原体，与重症病例(如脑炎、肺水肿)密切相关
CA16型柯萨奇病毒：手足口病常见病原体，症状通常较轻但传播力强
靶基因选择：
EV71：VP1衣壳蛋白基因(高度保守)
CA16：VP1基因5'非编码区(5'-UTR)
技术原理
双重荧光PCR(TaqMan探针法)：
EV71检测通道：FAM荧光标记探针
CA16检测通道：HEX/VIC荧光标记探针
内参系统：Cy5标记的人源RNase P基因
灵敏度：≤10拷贝/μL(两种病毒)
特异性：不与CA6、CA10等其他肠道病毒交叉反应
二、试剂盒组成与样本要求
核酸提取试剂 磁珠法全流程试剂(含载体RNA)
PCR预混液 含HotStart Taq酶、dUTP/UNG防污染系统
引物探针混合液 EV71-FAM、CA16-HEX双通道探针
对照系统 阳性对照(EV71/CA16 RNA混合物)、阴性对照、内标
样本类型与处理要求
最佳样本：
咽拭子(发病1-3天采集)
疱疹液(溃疡基底分泌物)
粪便样本(发病后可持续排毒2-4周)
保存与运输：
短期(≤72小时)：2-8℃
长期：-80℃(避免反复冻融)
运输：符合UN3373标准的生物安全包装
三、检测流程与结果解读
标准化操作流程
核酸提取：
样本预处理：咽拭子需充分震荡洗脱
提取体积：200μL样本上清
洗脱体积：50μL无核酸酶水
PCR反应体系：
总体积：25μL
组分比例：预混液(12.5μL)+引物探针(2μL)+模板(5μL)
扩增程序：
50℃ 2min(UNG活化)
→ 95℃ 10min
→ 45循环[95℃ 15sec → 60℃ 45sec](双通道采集)
结果判读标准
结果类型 EV71(FAM)
阳性 Ct≤35
可疑 35<Ct≤38
阴性 ≥40
四、临床价值与注意事项
临床应用优势
早期诊断：发病24小时内即可检出
疫情监控：可区分EV71(重症风险)与CA16感染
治疗指导：EV71阳性患者需密切观察神经系统症状
关键注意事项
采样质量：咽拭子应擦拭双侧扁桃体及咽后壁
抑制物处理：粪便样本建议10倍稀释后复测
变异株监控：定期验证引物探针与流行株匹配度
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