商品属性：
产品名称 | 伯克霍尔德氏菌属检测试剂盒 | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1563 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
检测目标
特异性检测伯克霍尔德氏菌属的保守基因：
recA基因（属水平标记，覆盖B. cepacia复合群、B. pseudomallei等）
特异靶点（如B. pseudomallei的TTS1基因，B. mallei的fliP基因）
覆盖病原种：
临床高危种：类鼻疽伯克霍尔德菌（B. pseudomallei）、鼻疽伯克霍尔德菌（B. mallei）
环境/条件致病种：洋葱伯克霍尔德菌（B. cepacia）、泰国伯克霍尔德菌（B. thailandensis）
方法原理
多重荧光PCR：
recA-FAM探针（通用检测） + TTS1-HEX/fliP-Cy5探针（分型），内标（VIC）监控全程。
采用抗抑制剂聚合酶，适配土壤、脓液等高复杂样本。
适用样本
临床：血液（败血症）、痰液（肺部感染）、伤口分泌物
环境：土壤、水体（疫源地监测）
二、试剂盒组分与操作流程
1. 核心组分
组分 功能说明
PCR预混液 含热启动Taq酶、dUTP/UNG防污染系统
探针引物混合液 recA-FAM/TTS1-HEX/fliP-Cy5，内标（VIC标记）
阳性对照 灭活B. pseudomallei K96243株DNA
核酸提取试剂 磁珠法（含腐殖酸去除柱，适配环境样本）
2. 操作步骤
样本处理：
血液/痰液：蛋白酶K消化后提取DNA。
土壤：5g样本+10mL PBS震荡，离心富集菌体。
PCR程序（25μL体系）：
50℃ 2min（UNG）→ 95℃ 10min → [95℃ 15s → 60℃ 45s]×45 cycles
三、性能与结果解读
1. 关键参数
指标 性能要求
灵敏度 10拷贝/反应（纯DNA）
特异性 不与假单胞菌、军团菌交叉
检出限 102 CFU/mL（血液）或103 CFU/g（土壤）
2. 结果判读
属阳性：recA（FAM）Ct≤35 → 伯克霍尔德氏菌感染。
种鉴别：
TTS1（HEX）阳性 → B. pseudomallei
fliP（Cy5）阳性 → B. mallei
无效检测：内标（VIC）无信号 → 需排查抑制剂干扰。
四、注意事项
生物安全
B. pseudomallei/mallei需BSL-3实验室操作（中国《人间传染的病原微生物名录》二类病原）。
采样要求：
类鼻疽患者急性期血液（发热48小时内）检出率最高。
局限性：
不能区分定植与感染（需结合培养或临床指标）。
五、应用场景
临床诊断：
类鼻疽（东南亚/中国南部流行区）的快速确诊。
囊性纤维化患者洋葱伯克霍尔德菌感染筛查。
公共卫生：
疫源地（如稻田土壤）病原监测。
生物反恐（鼻疽伯克霍尔德菌为潜在生物战剂）。
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关键字： 伯克霍尔德氏菌属;检测试剂盒;
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