小鼠Adiponectin/Acrp30elisa试剂盒
产品简介:
小鼠Adiponectin/Acrp30 ELISA试剂盒是一种用于特异性、高灵敏度定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中脂联素(Adiponectin)浓度的酶联免疫吸附检测试剂盒。脂联素是一种由脂肪细胞特异性分泌的蛋白质激素,参与调节葡萄糖代谢和脂肪酸氧化过程,在代谢调控和炎症反应中发挥重要作用。
英文名称 | Mouse Adiponectin/Acrp30 ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A129875 | 规格 | 48T/96T |

检测原理
试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)。具体流程如下:
包被:使用特异性抗小鼠Adiponectin抗体预包被于酶标板上。
结合:加入标准品或待测样本后,样本中的Adiponectin与固相抗体结合。
检测抗体:加入生物素化的抗小鼠Adiponectin抗体,形成夹心免疫复合物。
酶标反应:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,通过生物素-链霉亲和素特异性结合。
显色与检测:加入TMB显色底物,HRP催化无色底物氧化成蓝色物质,加入终止液后呈黄色。颜色深浅与Adiponectin浓度成正比。
定量分析:在450nm波长处测定吸光度值,通过标准曲线计算样本中Adiponectin浓度。
产品特性
检测范围:不同品牌试剂盒检测范围略有差异,如313pg/mL~20ng/mL或31.25~1000 pg/mL。
灵敏度:最小检出量可达9.38 pg/mL至36.5pg/mL。
特异性:与人TNF-α、TWEAK等无交叉反应,但与大鼠Adiponectin存在交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均小于10%,确保结果可靠性。
样本处理
血清:室温凝固后离心取上清。
血浆:使用EDTA或肝素抗凝剂,离心后收集上清。
细胞培养上清:离心去除细胞碎片后取上清。
组织样本:需制备组织匀浆后离心取上清。
样本应避免溶血和反复冻融。
应用领域
代谢疾病研究:肥胖、2型糖尿病、胰岛素抵抗机制解析。
心血管疾病:动脉粥样硬化、冠心病相关脂联素水平监测。
炎症调控:探究脂联素在抗炎及免疫调节中的作用。
药物开发:筛选靶向脂联素通路的代谢调节药物。
注意事项
严格按照说明书操作,避免交叉污染和非特异性结合。
样本避免反复冻融,未用完的板条密封冷藏(2-8℃)保存。
试剂盒组分不可混用,标准品建议一次性使用。
血浆、血清及组织样本需规范处理,避免溶血和杂质干扰。
该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,是兔MIP-3α/CCL20定量检测及相关疾病机制研究的可靠工具,广泛应用于兔免疫、炎症、感染等领域的科研。
常见问题解答 (FAQ)
Q1: 为什么要做“复孔”?
A: 建议每个样本(包括标准品)都做复孔(2-3个孔)。这样可以计算平均值,减少操作误差,提高数据的可信度。
Q2: 样本需要稀释吗?
A: 是的。如果样本浓度过高,超出了标准曲线的检测范围,需要根据预实验结果进行适当稀释。计算最终浓度时,记得乘以稀释倍数。
Q3: 结果出现“花板”(背景不均)怎么办?
A: 可能原因包括:洗板不干净、温育温度不均、加样时产生气泡、或者试剂(如底物)受光照分解。请检查洗板机是否堵塞,确保温育箱温度恒定。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
关键字: 小鼠;Adiponectin/Acrp30;ELISA试剂盒;
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