产品介绍：
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。将捕获抗体包被于微孔板上，依次加入标准品或样本，再加入HRP标记的检测抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物。加入底物TMB显色，颜色深浅与目标蛋白浓度成正比，通过酶标仪测定吸光度，计算样本浓度。
产品名称 | 小鼠Catalaseelisa试剂盒 | 英文名称 | Mouse Catalase ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129852 |
试剂盒组成
微孔酶标板：96孔或48孔配置。
标准品：不同浓度梯度，用于绘制标准曲线。
样本稀释液：用于稀释待测样本。
检测抗体-HRP：辣根过氧化物酶标记的检测抗体。
洗涤缓冲液：用于洗涤反应孔。
底物A和B：显色底物，与HRP反应显色。
终止液：终止显色反应。
封板膜：用于封闭反应孔。
说明书：提供详细操作步骤。
样本类型
血清：使用不含热原和内毒素的试管，收集血液后离心分离。
血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，离心取上清。
细胞上清液：离心去除颗粒和聚合物。
组织匀浆：组织加入生理盐水捣碎，离心取上清。
操作步骤
准备试剂和标准品：试剂盒平衡至室温，浓缩洗涤液溶解结晶。
设置孔板：空白孔、标准品孔和样本孔。
加样：加入标准品、样本和检测抗体，温育。
洗涤：彻底洗涤孔板，去除未结合成分。
显色：加入底物溶液，避光孵育。
终止：加入终止液，颜色变化停止。
测定：酶标仪测定吸光度，计算浓度。
性能特点
灵敏度：最低检测浓度小于1.0 pg/mL310。
特异性：不与其他类似结构蛋白交叉反应。
重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
贮藏：2-8℃避光防潮保存，有效期6个月3710。
注意事项
试剂盒仅供科研使用，不得用于临床诊断。
严格按照说明书操作，实验者违反操作后果自负。
样本应避免反复冻融，解冻后充分混匀。
主要优点缺点
维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高，特异性强，结果准确 可能存在交叉反应，易受干扰物影响
操作体验 流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测 步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测，长期看性价比尚可 单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量（如是否溶血）敏感
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试剂与样本准备阶段
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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