产品介绍:

检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法。将抗小鼠IGF-1的单克隆抗体包被在酶标板上,样本中的IGF-1与固相抗体结合,再加入酶标记的二抗,形成“抗体-抗原-酶标抗体”夹心复合物。加入底物后,酶催化底物显色,通过酶标仪测定吸光度(OD值),与标准曲线比较,计算出样本中IGF-1的浓度。
产品名称 | 小鼠IGF-1Relisa试剂盒 | 英文名称 | Mouse IGF-1R ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129891 |
检测性能

灵敏度:通常为4 pg/mL或更高。
检测范围:一般为2.74 pg/mL至2000 pg/mL。
特异性:不与结构类似的其他分子交叉反应。
重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%。
适用样本
血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等。

操作步骤

准备试剂和仪器:酶标仪(450nm)、恒温箱(37℃)、加样器等。
设置孔板:标准品孔、样本孔和空白对照孔。
加样:标准品和样本加入相应的孔中。
温育:封板后于37℃温育一定时间。
洗涤:去除未结合的物质。
加酶标抗体:加入HRP标记的检测抗体,温育后洗涤。
显色:加入底物溶液,避光孵育。
终止反应:加入终止液,测定OD值。
注意事项

样本处理:避免溶血、高血脂样本,组织匀浆需充分裂解。
试剂准备:浓缩洗涤液需按比例稀释,使用前充分摇匀。
操作规范:严格按照说明书操作,避免交叉污染。
结果分析:根据标准曲线计算样本浓度,注意稀释倍数。
应用领域
研究IGF-1在小鼠生长、发育、代谢等生理过程中的作用。
评估药物或治疗对IGF-1水平的影响。
主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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关键字: 小鼠;IGF-1R;ELISA试剂盒;
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