检验原理：
本试剂盒基于实时荧光定量 PCR 技术，针对季节性流感病毒 H3N2 亚型 HA 基因高度保守区域设计特异性引物和探针。在反应体系中，病毒 RNA 经逆转录为 cDNA 后，通过 Taq 酶介导的链式反应扩增目标序列，荧光信号随扩增产物积累而增强。当荧光值超过阈值时，判定为阳性结果，实现病毒核酸的定性检测。
| 产品名称 | 季节性流感病毒 H3N2 亚型 HA 基因核酸检测试剂盒 | 货号 | AP3002 |
产品分类
| 荧光PCR | 规格 | 50T |
主要组成成分：
核心组分：
H3N2 亚型 HA 基因特异性引物（上游引物、下游引物）
TaqMan 探针（标记 FAM 荧光基团）
逆转录酶、Hot-Start Taq 酶、dNTPs、Mg²⁺缓冲液
辅助材料：
阳性对照（灭活 H3N2 亚型病毒 RNA，用于验证检测有效性）
阴性对照（无模板试剂，用于排除污染）
裂解液（用于样本核酸释放）
核酸提取试剂（可选配套使用，需符合相关标准）
产品性能指标：
灵敏度：检测限≤500 copies/mL（WHO 标准参考品验证）。
特异性：与季节性 H1N1、乙型流感病毒无交叉反应。
精密度：批内/批间变异系数均≤5%（n = 20）。
稳定性：试剂盒在 2 - 8℃保存 12 个月，性能无显著下降。
注意事项：
操作规范：
样本处理需在生物安全柜中进行，避免气溶胶污染。
试剂配制需使用无核酸酶耗材，避免交叉污染。
反应体系需严格避光保存，防止荧光淬灭。
结果解读：
弱阳性结果（Ct 值 35 - 38）需重复检测确认。
阴性结果不排除其他呼吸道病原体感染。
安全警示：
阳性样本需按生物安全三级（BSL - 3）标准处理。
废弃样本需经 121℃高压灭菌 30 分钟后再丢弃。
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操作步骤：
整个流程遵循“样本处理 → 试剂配制 → 加样 → 上机检测 → 结果分析”的逻辑，核心是防污染和精准操作。
1. 样本处理 (核酸提取)
样本：鼻咽拭子、咽拭子或痰液样本。
裂解：将拭子浸入裂解液，充分混匀后室温静置10分钟。
提取：采用磁珠法或离心柱法提取总RNA，严格按照试剂盒说明书操作。
保存：洗脱后的RNA应立即使用或分装保存于-80℃。
2. 试剂配制与加样
反应体系准备：在试剂准备区配制Master Mix。根据待检测样本数计算总体积，通常按样本数 + 1管阴性对照 + 1管阳性对照的原则来配制。
推荐体系：例如，使用20μL体系的试剂盒，可包含qPCR预混液16μL、引物探针混合液4μL（具体体积请以实际说明书为准）。
分装：将配好的反应体系分装至PCR反应管中（如20μL/管）。
加样：在样本处理区，分别向反应管中加入5μL的模板RNA（样本、阳性质控、阴性质控）。盖紧管盖，短暂离心，避免污染和气泡。
3. 上机检测
运行程序：将反应管放入荧光定量PCR仪，运行预设程序。典型程序包括：
逆转录：50℃，15分钟（将RNA逆转录为cDNA）。
预变性：95℃，10分钟（激活Hot-Start Taq酶）。
扩增循环：通常为40个循环，每个循环包括变性（95℃，15秒） 和 退火/延伸（60℃，45秒），仪器在退火/延伸步骤同时采集荧光信号。
信号监测：仪器实时监测荧光信号变化，生成扩增曲线。
4. 结果分析与判定
Ct值：仪器根据荧光曲线自动计算阈值循环数（Ct值）。
结果判定：
阳性：样本Ct值 ≤ 37（具体阈值请以试剂盒说明书为准），且扩增曲线呈典型"S"型。
阴性：样本无Ct值或Ct值 > 40。
无效：阳性对照无Ct值或Ct值 > 35，或阴性对照有Ct值，需重新检测。
关键字： 季节性流感病毒;H3N2 亚型 HA 基因;检测试剂盒;
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