产品介绍:
禽流感病毒H9亚型(AIV-H9)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种专门用于体外定性检测禽流感病毒H9亚型(Avian Influenza Virus H9 Subtype)核酸的分子诊断工具。
该试剂盒基于实时荧光定量RT-PCR技术(qRT-PCR),主要用于禽类(如鸡、鸭、鹅)感染H9N2亚型禽流感病毒的早期辅助诊断、流行病学调查及活禽市场监测。H9N2亚型虽然通常表现为低致病性,但其在禽类中广泛流行,且具有跨越种属屏障感染人的能力,是重要的公共卫生监测对象。
产品名称 | 禽流感病毒H9亚型(AIV-H9)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3640 |
以下是关于该试剂盒的详细介绍:
检测原理与技术
该试剂盒主要采用TaqMan荧光探针法,针对H9亚型病毒的特异性基因序列进行检测。
靶标基因: 引物和探针通常靶向禽流感病毒血凝素(Hemagglutinin, HA)基因的H9亚型高度保守区域。该区域在不同H9N2毒株间变异较小,能保证检测的广谱性和特异性。
技术原理: 由于流感病毒是RNA病毒,试剂盒采用一步法RT-qPCR。
逆转录: 反应体系中的逆转录酶将样本中的病毒RNA逆转录为cDNA。
扩增与检测: 在PCR扩增过程中,特异性探针(通常标记为FAM荧光素)被酶切,释放出荧光信号。仪器实时监测信号变化,从而判断样本中是否存在H9亚型病毒核酸。
内标对照: 试剂盒通常包含阴性和阳性对照,部分高端产品还包含内源性内标(IC),用于监控样本采集、核酸提取及PCR扩增过程是否正常,防止假阴性。
�� 核心性能指标
根据市面上常见的商业化产品及说明书信息,该类试剂盒通常具备以下性能:
指标 参数 说明
检测样本 咽喉拭子、泄殖腔拭子、禽肉/内脏组织、环境涂抹样本 适用于临床及环境监测
检测下限 1×10² - 1×10³ copies/mL 灵敏度高,可检出微量病毒
特异性 强 不与H5、H7及其他亚型禽流感病毒发生交叉反应
检测时间 约1.5 - 2小时 含核酸提取及RT-PCR扩增步骤
保存条件 -20℃ ±5℃ 避光保存,避免反复冻融
�� 典型操作流程
样本采集: 使用灭菌棉签采集禽类的咽喉拭子或泄殖腔拭子,或采集发病禽的肌肉、内脏组织。
核酸提取: 使用试剂盒配套的病毒RNA提取试剂(磁珠法或离心柱法)提取样本中的总RNA。
反应体系配制: 将提取的RNA模板、PCR反应液、酶混合物等按比例加入PCR反应管中。
上机扩增: 放入荧光定量PCR仪(如ABI 7500、Roche LightCycler等)中运行程序。
结果判读:
阳性: FAM通道出现典型的S型扩增曲线,且Ct值 ≤ 35,表明样本中存在禽流感病毒H9亚型核酸。
可疑: Ct值在 35-38 之间,建议重复检测,若仍有扩增则判为阳性。
阴性: 无扩增曲线,或Ct值 > 38。
�� 临床与应用意义
早期诊断: 在禽群出现轻微呼吸道症状或产蛋下降时即可确诊,比病毒分离更快,有助于及时隔离病禽。
鉴别诊断: 用于区分H9N2与其他亚型(如高致病性H5N1或H7N9)的混合感染,指导防控措施。
公共卫生监测: H9N2是重要的“基因供体”,其内部基因常出现在新型重配病毒(如H7N9)中。此外,H9N2也能直接感染人(通常症状较轻),因此对禽源H9的监测是防止人畜共患病传播的第一道防线。
疫苗效果评估: 用于检测免疫禽群的带毒情况和排毒水平。
⚠️ 注意事项
用途限制: 市场上大多数此类产品明确标注“仅用于科研”或“实验室专用”,不作为临床诊断的唯一依据,购买时需注意产品说明。
防污染: PCR实验室必须严格分区(试剂准备区、样本制备区、扩增区),操作人员需穿戴一次性手套和口罩,防止气溶胶污染导致的假阳性。
结果解读: 阳性结果表明存在H9亚型病毒感染,但需结合禽群的临床症状(如咳嗽、产蛋率下降)、病理变化及流行病学史进行综合判断。由于H9N2常呈隐性感染,检出核酸不一定代表发病。
PCR试剂盒的核心类型:
1. 常规PCR试剂盒
原理:通过引物扩增目标DNA片段,产物经琼脂糖电泳检测。
特点:操作简单、成本低,适用于定性检测(如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒)。
典型应用:动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR(qPCR)试剂盒
探针法(TaqMan):
利用特异性探针结合目标序列,荧光信号实时监测扩增过程。
优势:高特异性(如牛白血病病毒试剂盒)、宽线性范围(10²–10⁷拷贝/μL)。
染料法(SYBR Green):
染料嵌入双链DNA发光,成本较低,但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术:LAMP、RPA等,无需热循环仪,适合现场检测。
公司正在出售的产品:
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