产品介绍:

禽流感病毒N9亚型(AIV-N9)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种专门用于检测禽类样本中禽流感病毒N9亚型核酸的分子诊断工具。该试剂盒基于实时荧光定量PCR(qPCR)技术,能够快速、灵敏地检测N9亚型病毒,是禽流感监测和防控的重要手段。
产品名称 | 禽流感病毒N9亚型(AIV-N9)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3641 |
1. 检测原理

该试剂盒采用一步法实时荧光RT-PCR(One-step Real-time RT-PCR)技术,通常基于TaqMan探针法。
靶标基因: 针对N9亚型禽流感病毒的神经氨酸酶(NA)基因保守序列设计特异性引物和探针。
反应机制: 反应体系中包含逆转录酶、DNA聚合酶、引物、探针和dNTPs。首先将病毒RNA逆转录为cDNA,随后进行PCR扩增。若样本中存在N9病毒核酸,FAM荧光标记的特异性探针会被水解,释放荧光信号。
内标质控(IC): 为了监控样本提取和扩增过程,防止假阴性,试剂盒通常包含内标(如禽源管家基因),标记不同的荧光通道(如HEX/VIC)。
2. 产品特点

高特异性: 能特异性识别N9亚型,通常不会与H5、H7、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒(NDV)等其他禽类常见病原体发生交叉反应。
高灵敏度: 最低检测限通常可达 1×10³ copies/mL(部分产品可达100 copies/反应),能够检测到极低浓度的病毒。
快速高效: 整个检测过程(包括核酸提取和PCR扩增)通常在 2-3小时 内完成。
抗干扰性强: 具备检测含PCR抑制物样本的能力,确保检测结果的稳定性。
3. 主要用途

临床辅助诊断: 用于检测疑似感染禽类的咽喉拭子、泄殖腔拭子、组织样本(如肺脏、脾脏)或环境样本(如粪便、污水),辅助确诊N9感染。
疫情监测与净化: 用于活禽市场、养殖场的定期监测,评估生物安全措施效果。
鉴别诊断: 用于与其他引起禽类呼吸道症状的疾病(如新城疫、传染性支气管炎)进行鉴别诊断。
4. 储存与使用注意事项

储存条件: 试剂盒组分(特别是酶混合液)通常需要 -20℃ 避光保存,避免反复冻融(通常建议不超过3-5次),有效期通常为12个月。
样本类型: 主要用于检测拭子样本(咽喉、泄殖腔)、组织匀浆液或环境样本。
操作规范: 需在具备PCR检测资质的实验室进行,严格分区操作(试剂准备区、样本制备区、扩增区),防止气溶胶污染。
结果判读(参考值):
阳性: FAM通道扩增曲线呈典型“S”型,且Ct值 ≤ 35-40(不同厂家设定阈值不同,通常为35或40)。
阴性: 无扩增曲线,或Ct值大于阈值。
无效: 阳性对照未扩增或内标(如有)未扩增,提示实验失败,需重做。
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通用操作流程与注意事项:
1. 样本制备
使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA,需设置阳性、阴性对照。
关键点:避免交叉污染,阳性对照单独存放。
2. 反应体系配置
常规PCR:引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR:需额外加入探针或染料。
3. 扩增程序
常规PCR:
预变性→循环扩增→延伸
qPCR:
预变性→循环扩增(荧光采集)
4. 结果判读
常规PCR:电泳观察条带大小(如阳性对照需出现预期条带)。
qPCR:Ct值≤35为阳性,阴性对照无信号。
关键字: 禽流感病毒N9亚型 ;AIV-N9;检测试剂盒;荧光PCR法;
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