产品介绍：
猪多杀性巴氏杆菌(SPA)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 是一种专门用于体外定性检测猪多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida，Pm）特异性核酸的分子诊断工具。
该试剂盒基于实时荧光定量PCR技术（qPCR），主要用于猪肺疫（又称猪巴氏杆菌病）的早期快速诊断、鉴别诊断及流行病学调查。猪多杀性巴氏杆菌是猪呼吸道疾病综合征（PRDC）的重要原发性病原之一，常继发于蓝耳病或圆环病毒等病毒感染后，精准检测对于猪场的疫病防控至关重要。
产品名称 | 猪多杀性巴氏杆菌(SPA)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) | 货号 | AP3656 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
以下是关于该试剂盒的详细介绍：
检测原理与技术
该试剂盒主要采用TaqMan荧光探针法，通过特异性引物和探针靶向猪多杀性巴氏杆菌的保守基因序列进行扩增和检测。
靶标基因：
物种特异性基因： 通常靶向猪多杀性巴氏杆菌特有的毒力相关基因或保守的看家基因（如ompA、kmt或16S rRNA基因）。这些序列具有高度的特异性，能有效区分猪源株与其他动物源株。
内标（IC）： 试剂盒通常包含内源性内标（Internal Control），用于监控样本采集、核酸提取及PCR扩增过程是否正常，防止假阴性。
技术原理： 由于多杀性巴氏杆菌是细菌（DNA），试剂盒采用荧光PCR法（不需要逆转录步骤）。
变性与退火： 在PCR仪中，DNA双链解开，特异性引物与模板结合。
延伸与检测： 在Taq酶作用下合成新链。随着目标DNA序列的指数级扩增，TaqMan探针被切断，释放出荧光信号（通常为FAM荧光素）。
结果判定： 仪器实时监测荧光信号的变化，从而判断样本中是否存在猪多杀性巴氏杆菌核酸。
�� 核心性能指标
指标 参数 说明
检测样本 肺脏、脾脏、肝脏、淋巴结、鼻拭子、支气管肺泡灌洗液 适用于病理组织及分泌物
检测下限 1×10³ - 1×10⁴ copies/mL 灵敏度高，可检出微量细菌
特异性 强 不与猪链球菌、副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌等交叉反应
检测时间 约1.5 - 2小时 含DNA提取及PCR扩增步骤
保存条件 -20℃ ±5℃ 避光保存，避免反复冻融
�� 典型操作流程
样本采集： 采集病死猪的肺脏、脾脏、肝脏或淋巴结组织，或活猪的鼻拭子。
DNA提取： 使用试剂盒配套的细菌DNA提取试剂（磁珠法或离心柱法）提取样本中的总DNA。
反应体系配制： 将提取的DNA模板、PCR反应液（含酶、dNTPs、引物探针）按比例加入PCR反应管中。
上机扩增： 放入荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Roche LightCycler等）中运行程序。
结果判读：
阳性： FAM通道出现典型的S型扩增曲线，且Ct值 ≤ 35-40，表明样本中存在猪多杀性巴氏杆菌核酸。
阴性： FAM通道无扩增曲线，或Ct值 > 40。
�� 临床与应用意义
早期诊断： 在猪群出现高热、呼吸困难（犬坐姿势）、咽喉肿胀等临床症状初期即可确诊，比细菌分离培养更快。
鉴别诊断： 用于区分猪肺疫与其他引起呼吸道症状的疾病（如猪喘气病、传染性胸膜肺炎、蓝耳病等）。
混合感染检测： 猪多杀性巴氏杆菌常作为继发感染病原，该试剂盒常与其他病毒试剂盒（如PRRSV、PCV2）联合使用，分析混合感染情况。
药敏与防控： 结合检测结果，指导临床用药（如抗生素选择）及疫苗免疫策略。
⚠️ 注意事项
用途限制： 市场上大多数此类产品明确标注“仅用于科研”或“实验室专用”，不作为临床诊断的唯一依据，购买时需注意产品说明。
防污染： PCR实验室必须严格分区（试剂准备区、样本制备区、扩增区），操作人员需穿戴一次性手套和口罩，防止气溶胶污染导致的假阳性。
结果解读： 阳性结果表明存在猪多杀性巴氏杆菌感染，但需结合猪群的临床症状（如纤维素性胸膜肺炎病变）、病理变化及流行病学史进行综合判断。由于该菌常存在于健康猪的上呼吸道，检出核酸不一定代表发病，需结合载量（Ct值）综合评估。
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通用操作流程与注意事项：
1. 样本制备
使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。
关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。
2. 反应体系配置
常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR：需额外加入探针或染料。
3. 扩增程序
常规PCR：
预变性→循环扩增→延伸
qPCR：
预变性→循环扩增（荧光采集）
4. 结果判读
常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。
qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。
关键字： 猪多杀性巴氏杆菌 ;SPA ;检测试剂盒;荧光PCR法;
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