产品介绍:

猪附红细胞体(SEP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种专门用于检测猪附红细胞体(Sus Eperythrozoon,简称 Mycoplasma suis)的高灵敏度分子诊断工具。
猪附红细胞体病是一种由寄生在猪红细胞表面或血浆中的支原体引起的传染病。该病常呈隐性感染,但在应激(如转栏、运输、免疫抑制)情况下会急性发作,导致猪只出现高热、贫血、黄疸和消瘦,严重影响生长性能。由于该病原难以通过普通染色镜检确诊(易漏检),荧光PCR法因其极高的灵敏度和特异性,成为目前实验室确诊的首选方法。
产品名称 | 猪附红细胞体(SEP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) | 货号 | AP3662 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
以下是关于该试剂盒的详细介绍:
�� 检测原理

该试剂盒基于实时荧光定量PCR(qPCR)技术,通常采用TaqMan探针法。
核心机制:
靶标基因: 针对猪附红细胞体基因组中16S rRNA基因或msp2(主要表面蛋白)基因的保守区域设计特异性引物和探针。
DNA扩增: 猪附红细胞体属于原核生物(支原体科),提取的全血或组织样本DNA直接作为模板进行PCR扩增。
荧光检测: 反应体系中包含特异性荧光标记探针(通常为FAM通道)。若样本中含有SEP DNA,在扩增过程中会释放荧光信号,仪器通过Ct值进行定性判断。
�� 主要特点与性能

特性 描述
高特异性 专门识别猪附红细胞体,不与猪肺炎支原体、猪圆环病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等发生交叉反应。
高灵敏度 最低检测限可达 1×10³ Copies/mL(部分产品可达10² Copies/mL),能检出极低含量的病原体DNA,适合早期和隐性感染筛查。
抗干扰强 针对血液样本优化,能有效抵抗血红素等PCR抑制物的影响。
快速高效 全程检测时间约 1.5-2 小时,远快于传统的吉姆萨染色镜检法(且镜检漏检率高)。
� 临床与应用意义

隐性带菌检测: 用于种猪场的净化,检出外表健康但携带病原的隐性感染猪,防止垂直传播。
精准诊断: 在猪群出现不明原因发热、皮肤苍白(贫血)、尿液发黄(黄疸)时,快速确诊是否为附红细胞体病。
混合感染鉴别: 猪附红细胞体常与圆环病毒(PCV2)、弓形虫等混合感染,该试剂盒可帮助区分病因。
药物疗效评估: 通过定量检测治疗前后血液中的病原载量,评估治疗效果。
适用样本类型
全血样本: 抗凝全血(EDTA或柠檬酸钠抗凝,最常用,适用于活猪筛查)。
组织样本: 脾脏、淋巴结、肝脏等组织研磨液(用于病死猪确诊)。
血清/血浆: 也可用于检测,但全血检出率通常更高。
⚠️ 注意事项

样本抗凝: 采集血液样本时必须使用抗凝剂(如EDTA),防止血液凝固导致DNA提取困难。
结果判读:
阳性: Ct值 ≤ 35-40(视说明书而定)且扩增曲线呈典型S型。
阴性: Ct值 > 40 或无Ct值显示。
无效: 阳性对照未扩增或阴性对照出现扩增(提示实验失败或污染)。
临床结合: 检测结果仅供参考,最终诊断需结合猪群的临床症状(如贫血、黄疸)、病理变化及其他血液学检查(如红细胞计数)综合判断。
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通用操作流程与注意事项:
1. 样本制备
使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA,需设置阳性、阴性对照。
关键点:避免交叉污染,阳性对照单独存放。
2. 反应体系配置
常规PCR:引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR:需额外加入探针或染料。
3. 扩增程序
常规PCR:
预变性→循环扩增→延伸
qPCR:
预变性→循环扩增(荧光采集)
4. 结果判读
常规PCR:电泳观察条带大小(如阳性对照需出现预期条带)。
qPCR:Ct值≤35为阳性,阴性对照无信号。
关键字: 猪附红细胞体 ;SEP; 荧光PCR法;检测试剂盒;
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