产品介绍:

猪蓝耳病病毒通用型(PRRSV-U)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) 是一种专门用于体外定性检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus, PRRSV)核酸的分子诊断工具。
产品名称 | 猪蓝耳病病毒通用型(PRRSV-U)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) | 货号 | AP3672 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
该试剂盒基于实时荧光定量RT-PCR技术(qRT-PCR),被称为“通用型”(Universal),意味着它能够检测所有已知的PRRSV毒株,包括美洲型(Type 2)和欧洲型(Type 1),以及它们的各种变异株(如高致病性蓝耳病病毒、NADC30-like株等)。它是目前猪场监测、临床诊断和流行病学调查中最核心的检测手段之一。
以下是关于该试剂盒的详细介绍:
检测原理与技术

该试剂盒主要采用TaqMan荧光探针法,通过特异性引物和探针靶向PRRSV的保守基因序列进行扩增和检测。
靶标基因:
ORF7基因(核衣壳蛋白N蛋白基因): 这是最常用的靶标。虽然ORF7在不同毒株间存在一定变异,但通过精心设计引物和探针(或使用简并碱基),通用型试剂盒能够覆盖所有主要基因型。
ORF5基因(主要囊膜糖蛋白GP5基因): 部分通用型试剂盒也会选择此基因,但因变异较大,设计难度更高。
内部对照(IC): 试剂盒通常包含内源性内标(如猪源RNase P基因),用于监控样本采集质量及是否存在PCR抑制物。
技术原理: 由于蓝耳病病毒是RNA病毒,试剂盒采用一步法RT-qPCR。
逆转录: 反应体系中的逆转录酶将样本中的病毒RNA逆转录为cDNA。
扩增与检测: 在PCR扩增过程中,特异性探针(通常标记为FAM荧光素)被酶切,释放出荧光信号。仪器实时监测信号变化,从而判断样本中是否存在PRRSV核酸。
�� 核心性能指标

指标 参数 说明
检测样本 血清、血浆、肺脏、淋巴结、扁桃体、精液、口腔液 适用于多种临床样本
检测下限 1×10³ - 1×10⁴ copies/mL 灵敏度高,可检出早期感染
特异性 强 不与猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病毒(PRV)等交叉反应
检测时间 约1.5 - 2小时 含核酸提取及RT-PCR扩增步骤
保存条件 -20℃ ±5℃ 避光保存,避免反复冻融
�� 典型操作流程

样本采集:
活猪: 采集抗凝全血(用于分离血浆/血清)或口腔液。
死猪/剖检: 采集肺脏、淋巴结(尤其是肺门淋巴结)、扁桃体等组织样本。
核酸提取: 使用试剂盒配套的病毒RNA提取试剂(磁珠法或离心柱法)提取样本中的总RNA。
反应体系配制: 将提取的RNA模板、PCR反应液、酶混合物等按比例加入PCR反应管中。
上机扩增: 放入荧光定量PCR仪(如ABI 7500、Roche LightCycler等)中运行程序。
结果判读:
阳性: FAM通道出现典型的S型扩增曲线,且Ct值 ≤ 35-40,表明样本中存在PRRSV核酸。
阴性: FAM通道无扩增曲线,或Ct值 > 40。
�� 临床与应用意义

早期诊断: 在猪群出现发热、呼吸道症状或母猪流产前即可检测到病毒血症,实现早期预警。
全面覆盖: 由于PRRSV极易变异和重组,“通用型”试剂盒避免了因毒株变异导致的漏检,是监测复杂猪场环境的首选。
区分野毒与疫苗毒: 虽然通用型试剂盒无法直接区分野毒和疫苗毒(因为它们都是PRRSV),但通过定量检测Ct值(病毒载量)和动态监测抗体变化,可以辅助判断感染状态(如急性感染通常Ct值低,疫苗免疫后Ct值通常较高且短暂)。
精液检测: 用于检测种公猪精液,防止通过精液垂直传播病毒。
⚠️ 注意事项
用途限制: 市场上大多数此类产品明确标注“仅用于科研”或“实验室专用”,不作为临床诊断的唯一依据,购买时需注意产品说明。
防污染: PCR实验室必须严格分区(试剂准备区、样本制备区、扩增区),操作人员需穿戴一次性手套和口罩,防止气溶胶污染导致的假阳性。
结果解读: 阳性结果表明存在PRRSV感染,但需结合猪群的临床症状、免疫背景(是否接种过蓝耳疫苗)及病理变化进行综合判断。单纯的核酸检测阳性可能是疫苗免疫后的正常反应,也可能是野毒感染。
公司正在出售的产品:

白介素-1受体拮抗剂抗体 | SOCS6 细胞因子信号传导抑制蛋白6抗体 |
辣根过氧化物酶标记的SARS冠状病毒2核衣壳蛋白单克隆抗体 | 细胞转录因子ELK1抗体 |
SGCE SGCE蛋白抗体 | CCDC72 卷曲螺旋结构域蛋白72抗体 |
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小鼠三叶因子3(TFF3)PCR检测试剂盒 | 大鼠摄食抑制因子1(NES1)PCR检测试剂盒 |
通用操作流程与注意事项:
1. 样本制备
使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA,需设置阳性、阴性对照。
关键点:避免交叉污染,阳性对照单独存放。
2. 反应体系配置
常规PCR:引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR:需额外加入探针或染料。
3. 扩增程序
常规PCR:
预变性→循环扩增→延伸
qPCR:
预变性→循环扩增(荧光采集)
4. 结果判读
常规PCR:电泳观察条带大小(如阳性对照需出现预期条带)。
qPCR:Ct值≤35为阳性,阴性对照无信号。
关键字: 猪蓝耳病病毒通用型;PRRSV-U; 荧光PCR法;核酸检测试剂盒;
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