产品介绍:
猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus, CSFV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种专门用于检测猪瘟病毒核酸的分子诊断工具。该试剂盒基于实时荧光定量RT-PCR技术,能够快速、灵敏地检测样本中的猪瘟病毒,是猪瘟防控、临床诊断和疫情监测的核心手段。
1. 检测原理
该试剂盒采用一步法实时荧光RT-PCR(One-step Real-time RT-PCR)技术,通常基于TaqMan探针法。
产品名称 | 猪瘟病毒(CSFV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3673 |
靶标基因: 针对CSFV基因组中的高度保守区域设计特异性引物和探针。常用的靶标区域包括5'-UTR(非编码区)或E2基因。部分试剂盒通过E2基因的差异设计,能够区分CSFV与牛病毒性腹泻病毒(BVDV),避免交叉反应。
反应机制: 反应体系中包含逆转录酶、DNA聚合酶、引物、探针和dNTPs。首先将病毒RNA逆转录为cDNA,随后进行PCR扩增。若样本中存在CSFV核酸,FAM荧光标记的特异性探针会被水解,释放荧光信号。
内标质控(IC): 为了监控样本提取和扩增过程,防止假阴性,试剂盒通常包含内标(如猪β-actin基因或外源性内标),标记不同的荧光通道(如HEX/VIC)。
2. 产品特点高特异性: 引物和探针经过优化,能特异性识别CSFV,通常不会与伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)等其他猪常见病原体发生交叉反应。
高灵敏度: 最低检测限通常可达 1×10³ copies/mL(部分产品可达100-500 copies/mL),能够检测到极低浓度的病毒,显著高于病毒分离法。
快速高效: 整个检测过程(包括核酸提取和PCR扩增)通常在 2小时 左右完成。
防污染机制: 试剂盒通常含有 UNG酶 系统,可有效降解可能存在的扩增产物污染,防止假阳性结果。
3. 主要用途
临床辅助诊断: 用于检测疑似感染猪的血清、全血、扁桃体、脾脏、淋巴结等组织样本,辅助确诊猪瘟感染。
疫情监测与净化: 用于猪场的定期监测,评估疫苗免疫效果,建立无疫区。
疫苗质检: 用于猪瘟疫苗生产过程中的外源病毒检测和质量控制。
4. 储存与使用注意事项
储存条件: 试剂盒组分(特别是酶混合液)通常需要 -20℃ 避光保存,避免反复冻融(通常建议不超过3次),有效期通常为12个月。
样本类型: 主要用于检测抗凝全血、血清、组织匀浆液(如扁桃体、淋巴结)。
操作规范: 需在具备PCR检测资质的实验室进行,严格分区操作(试剂准备区、样本制备区、扩增区),防止气溶胶污染。
结果判读(参考值):
阳性: FAM通道扩增曲线呈典型“S”型,且Ct值 ≤ 35-40(不同厂家设定阈值不同,通常为35或40)。
阴性: 无扩增曲线,或Ct值大于阈值。
无效: 阳性对照未扩增或内标(如有)未扩增,提示实验失败,需重做。
PCR试剂盒的核心类型:
1. 常规PCR试剂盒
原理:通过引物扩增目标DNA片段,产物经琼脂糖电泳检测。
特点:操作简单、成本低,适用于定性检测(如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒)。
典型应用:动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR(qPCR)试剂盒
探针法(TaqMan):
利用特异性探针结合目标序列,荧光信号实时监测扩增过程。
优势:高特异性(如牛白血病病毒试剂盒)、宽线性范围(10²–10⁷拷贝/μL)。
染料法(SYBR Green):
染料嵌入双链DNA发光,成本较低,但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术:LAMP、RPA等,无需热循环仪,适合现场检测。
公司正在出售的产品:
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关键字: 猪瘟病毒 ;CSFV ;检测试剂盒;荧光PCR法;
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