产品概述:

Recombinant Human Acid phosphatase”(重组人酸性磷酸酶)并非单一蛋白,而是一类具有酸性磷酸酶活性的人源重组蛋白的总称。根据现有的生物试剂信息,该家族主要包括ACP1、ACP5(TRAP)、ACP6以及紫色酸性磷酸酶(PAP)等成员,它们在分子特性、组织分布和生物学功能上各有侧重。
产品名称; Recombinant Human Acid phosphatase
别名; Acid phosphatase 1 soluble, Acid phosphatase of erythrocyte, ACP1, Adipocyte acid phosphatase, Cytoplasmic phosphotyrosyl protein phosphatase, HAAP, LMW-PTP, LMW-PTPase, Low molecular weight cytosolic acid phosphatase, Low molecular weight phosphotyrosine protein phosphatase, PAP1, PAP2, phosphatase, acid, of erythrocyte, PPAC_HUMAN, Protein tyrosine phosphatase, PTPase, Purple acid phosphatase
宿主; E.Coli
表达区间; 1-158
分子量; 17.3 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
存储条件:

冻干状态: 存储于-20°C以下,可稳定保存长达12个月。
复溶后: 在2-8°C下可保存1个月,需保持无菌环境。
注意事项: 避免反复冻融,以防止蛋白降解或活性损失。
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
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关键字: Acid phosphatase;17.3 kDa ; 1-158;
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