产品原理
本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术（探针法），通过Taq酶的5'→3'外切酶活性水解探针，释放荧光报告基团（如FAM），实现靶基因的定量检测。探针5'端标记荧光基团，3'端标记淬灭基团，扩增过程中荧光信号与产物积累量成正比，通过标准曲线对目标DNA/RNA进行精确定量。
产品名称 | 五味子探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Fructus Schisandrae Chinensis Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4950 |
产品特点
高特异性：引物与探针针对五味子保守序列设计，避免与其他微生物交叉反应。
灵敏度高：检测下限可达10²拷贝/μL，线性范围覆盖5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。
即开即用：预混缓冲液与酶体系，用户仅需提供模板DNA/RNA。
内控设计：含阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），可区分假阴性结果。
兼容性：适用于常规qPCR仪，支持FAM通道荧光信号采集。
组分清单
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 探针法qPCR缓冲液 | 500 μL |
| 试剂二 | qPCR酶混合液（含逆转录酶） | 100 μL |
| 试剂三 | 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL |
| 试剂四 | 五味子特异性引物混合液 | 100 μL |
| 试剂五 | 五味子探针（FAM标记） | 50 μL |
| 试剂六 | 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL |
| 试剂七 | 使用说明书 | 1份 |
实验步骤
1. 标准曲线制备
将阳性对照按10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL），每管加入45 μL稀释液与5 μL阳性对照，冰上操作。
2. 样本处理
提取待测样本RNA/DNA，建议设置阴性对照（水）和制备对照（PC）。
3. PCR反应体系（20 μL）
| 成分 | 体积 |
| qPCR缓冲液 | 10 μL |
| 酶混合液 | 2 μL |
| 探针 | 1 μL |
| 引物混合液 | 2 μL |
| 模板 | 5 μL |
4. 反应程序
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 50℃ | 30 min |
| 预变性 | 94℃ | 10 min |
| 扩增（40循环） | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集荧光） |
数据分析
定量分析：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。
定性判定：Ct≤35为阳性，Ct≥40为阴性；35<Ct<40需复测。
注意事项
操作需在无污染环境下进行，建议使用带滤芯枪头。
试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。
仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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