预期用途
基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术，专用于石斛（Dendrobium spp.）的核酸定性及定量检测，适用于科研用途（非临床）。
产品名称 | 石斛探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Herba Dendrobii Probe-based PCR Identification Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4976 |
检验原理
采用实时荧光定量PCR技术，针对石斛基因保守区域设计特异性引物及探针。探针5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团。PCR扩增时，Taq酶切割探针释放荧光信号，通过监测荧光强度实现靶序列的定性与定量分析。
试剂盒组成
| 组分 | 规格 | 功能说明 |
| 石斛扩增液 | 25μL×1管 | 含特异性引物及探针 |
| 石斛反应液 | 975μL×1管 | PCR主反应混合液 |
| 阳性质控品 | 50μL×1管 | 1×10⁸拷贝/μL石斛DNA片段 |
| 阴性质控品 | 50μL×1管 | 无核酸酶水 |
| 说明书 | 1份 | 操作指南 |
注意：不同批号组分不可混用，避免反复冻融（≤7次）。
储存及有效期
储存条件：-20℃±5℃避光保存。
有效期：12个月（未开封）。
适用仪器
支持ABI系列、Bio-Rad、LightCycler等荧光定量PCR仪（需配备FAM通道）。
样本要求
样本类型：植物组织、DNA提取物（建议使用商品化提取试剂盒）。
保存与运输：短期-20℃保存，长期-70℃；运输需2~8℃冰袋，避免反复冻融。
操作步骤
1. 样本DNA提取
使用无核酸酶污染的提取方法，推荐配套病毒基因组DNA提取试剂盒。
2. 试剂配制（试剂准备区）
按N（样本数+2对照）计算反应管数，每管加入：
石斛反应液：19.5μL
石斛扩增液：0.5μL
分装后转移至样本处理区。
3. 加样（样本处理区）
分别加入5μL待测DNA、阳性质控品、阴性质控品至对应反应管。
4. PCR扩增（扩增区）
循环程序：
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 55-60℃ | 30 sec | 40 |
5. 结果分析
阳性判定：Ct值≤35；
阴性判定：Ct值≥40或无扩增曲线；
可疑结果：35<Ct<40需复测。
注意事项
分区操作（试剂配制、样本处理、扩增），避免交叉污染。
使用一次性耗材，实验后消毒工作台。
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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