产品概述:

Recombinant Human Cystatin-B(人源胱抑素B重组蛋白)是一种在大肠杆菌(E. coli)中表达的重组蛋白,作为细胞内半胱氨酸蛋白酶(如组织蛋白酶B、H、L)的抑制剂,主要用于研究其在防止溶酶体蛋白酶泄漏、调控细胞凋亡以及进行性肌阵挛癫痫(EPM1)发病机制中的作用1。
产品名称; Recombinant Human Cystatin-B
别名; CHROW21, CPI B, CPI-B, CST 6, CST6, CSTB, Cystatin B, Cystatin B (stefin B), Cystatin-B, CYTB, CYTB_HUMAN, EPM1, EPM1A, Liver thiol proteinase inhibitor, PME, Stefin-B, STF B, STFB, ULD
宿主; E.Coli
表达区间; 1-98
分子量; 10.7 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
存储条件:

冻干状态: 存储于-20°C以下,可稳定保存长达12个月。
复溶后: 在2-8°C下可保存1个月,需保持无菌环境。
注意事项: 避免反复冻融,以防止蛋白降解或活性损失。
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
公司正在出售的产品:

钙粘蛋白21抗体 | PE-Cy7标记人CD10单克隆抗体 |
肿瘤易感基因101蛋白抗体 | 动物组织醛酮还原酶1A(aldo-keto reductase 1A)活性比色法定量检测试剂盒 |
糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体抗体 | 免疫细胞化学AP酶联NBT/BCIP基础检测试剂盒(无一抗和二抗) |
EB病毒核抗原1结合蛋白2抗体 | 冰冻切片组织MYC蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
肾组织固着液(BUBOSCQ-BRAZIL固着液) | 冰冻切片组织CASPASE-9蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
裂解液IX:真菌/酵母细胞裂解液 | 磷酸二酯酶1B(Phosphodiesterase 1B) |
细胞钙调神经磷酸酶(CALCINEURIN;PP2B)活性定磷比色法定量检测试剂盒 | 内皮细胞纤溶酶原激活抑制蛋白1抗体 |
糖果柠檬酸比色法定量检测试剂盒 | 胆囊收缩素8抗体 |
细胞CASEIN KINASE 1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 衣壳蛋白-ζ1抗体 |
Arf1鸟苷酸酶活性分析试剂盒 | 9号染色体开放阅读框79抗体 |
微管相关同源蛋白TPX2单克隆抗体 | 淋巴组织表达受体蛋白样蛋白2抗体 |
ANNEXIN V-FITC标记法细胞凋亡检测试剂盒 | Recombinant Human Cystatin-BT淋巴细胞活化蛋白MRFAP1抗体 |
监理蛋白抗体 | LARP1蛋白抗体 |
关键字: Cystatin-B;10.7 kDa; 1-98;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
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