操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

Recombinant Human LCN1(重组人脂ocal素-1)是一种在大肠杆菌或HEK293细胞中表达的重组蛋白,作为泪液和唾液中的关键成分,具有结合并运输疏水分子的能力,在润滑、抗菌及维持眼表稳态中发挥重要作用。
产品名 | Recombinant Human LCN1 | 分子量 | 17.3 kDa |
表达区间 | 19-176 | 货号 | XG-DB2494 |
别名
LCN1, LCN1_HUMAN, Lipocalin 1 (protein migrating faster than albumin, tear prealbumin), Lipocalin 1 like 2, Lipocalin-1, PMFA, Tear lipocalin, Tear prealbumin, Tlc, TP, VEG protein, VEGP, Von Ebner gland protein
宿主; E.Coli
表达区间; 19-176
分子量; 17.3 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

高迁移率族蛋白N2抗体 | PHD指蛋白21A抗体 |
组织相容性复合体蛋白2(HLA-DMB)抗体 | TRP高效液相色谱电化学定量检测试剂盒 |
脱氢酶/还原酶家族成员2抗体 | 组织前列腺型酸性磷酸酶(PACP)活性比色法定量检测试剂盒 |
FAM21D蛋白抗体 | P35蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
细胞糖原高碘酸希尔(PAS)法染色试剂盒 | 冰冻切片组织INSULIN 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
酵母菌SD-URA培养基(半乳糖) | 血液赖(lysine)含量化学比色法定量检测试剂盒 |
血小板活化因子乙酰水解酶(PAF AH)活性比色法定量检测试剂盒 | 凝血因子11轻链抗体 |
砷元素检测样品处理试剂盒 | 抵抗素样分子α抗体 |
细胞基质金属 3H同位素标记检测试剂盒 | 载脂蛋白M抗体 |
蛋白电泳伊红黄色染色试剂盒 | APC标记小鼠CD38单克隆抗体 |
AF750标记的DNA修复蛋白Rad50抗体 | 磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体 |
冰冻切片TUNEL荧光法(Fluorescein)测定试剂盒 | Recombinant Human LCN1β半乳糖苷酶1样蛋白3抗体 |
钾通道多聚体结构域KCTD18抗体 | IRG1蛋白抗体 |
重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: LCN1;17.3 kDa; 19-176;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。