操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

LIMD2是细胞骨架相关蛋白,通过LIM结构域与多种信号分子(如ILK、PINCH)相互作用,调控细胞黏附、迁移及EMT(上皮-间充质转化);研究发现其在多种肿瘤(如肺癌、肝癌)中异常表达,可能通过影响肿瘤微环境促进侵袭转移,是潜在的肿瘤标志物。
产品名称; Recombinant Human LIMD2
别名; LIM domain containing 2, LIM domain-containing protein 2, Limd2, LIMD2_HUMAN, MGC10986
宿主; E.Coli
表达区间; 1-127
分子量; 13.9 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

睾丸表达蛋白19A抗体 | PLEKHA7蛋白抗体 |
组织相容性抗原DQA1/DQA2抗体 | 白三烯B4(LTB4)高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
突触融合蛋白1A/1B抗体 | 破骨细胞型抗酒石酸酸性磷酸酶(STRACP)活性比色法定量检测试剂盒 |
FAM27D1蛋白抗体 | 载玻片细胞P27蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
冰冻切片a-染色试剂盒 | INSULIN 蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 |
酵母菌斑杂交试剂盒 | 细胞亮(leucine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
动物细胞总ATP酶(total ATPase)活性比色法定量检测试剂盒 | 膜相关环指蛋白5抗体 |
土壤汞元素比色法定量检测试剂盒 | 凋亡加强结构域蛋白14抗体 |
体液基质金属(MMP-2)明胶法比色定量检测试剂盒 | 胰岛素样生长因子1抗体 |
蛋白质西方杂交免疫印迹消除试剂盒 | AF647标记人CD57单克隆抗体 |
AF750标记的神经元核抗原抗体 | 磷酸化IRE1蛋白抗体 |
非突触体脑组织线粒体分离试剂盒 | Recombinant Human LIMD2γS-crystallin蛋白抗体 |
基质金属蛋白酶-8/胶原酶2抗体 | HS3ST3B1蛋白抗体 |
重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: LIMD2;13.9 kDa; 1-127;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。