操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

MIP-5主要由淋巴细胞和单核细胞产生,通过与靶细胞表面的CCR1受体结合,介导免疫细胞向炎症部位迁移。它在慢性炎症、动脉粥样硬化及肿瘤微环境的形成中扮演重要角色。重组MIP-5蛋白为体外研究该趋化因子的生物学功能及其信号通路提供了可靠的实验材料。
产品名称; Recombinant Human Macrophage inflammatory5
别名; C-C motif chemokine 15, C-C motif chemokine ligand 15, CC chemokine 3, CCL15, CCL15(29-92), CCL15_HUMAN, Chemokine (C C motif) ligand 15, Chemokine CC-2, Chemokine CC2, HCC-2, HCC2, HMRP 2B, HMRP2B, Leukotactin 1, Leukotactin-1, LKN-1, LKN1, Macrophage inflammatory protein 5, MIP 1D, MIP-1 delta, MIP-1D, MIP-5, MIP1 delta, MIP1d, MIP5, MRP 2B, Mrp-2b, Mrp2b, NCC 3, NCC-3, NCC3, New CC chemokine 3
宿主; E.Coli
表达区间; 22-113
分子量; 10 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

睾丸特异性碱性蛋白Y2抗体 | PRDM10k单克隆抗体 |
转铁蛋白受体(CD71)抗体 | 动物细胞醛酮还原酶1D(aldo-keto reductase 1D)活性比色法定量检测试剂盒 |
微小细胞血症相关转录因子抗体 | 组织谷草酰转氨酶(GOT)活性光谱法定量检测试剂盒 |
FAM50B蛋白抗体 | 细胞骨架(肌动蛋白微丝;F-ACTIN)绿色荧光染色试剂盒 |
植物氧化型甘肽(GSSG)浓度高效液相色谱定量检测试剂盒 | 细胞TUBULIN蛋白表达比色法定量检测试剂盒 |
腺病毒LacZ穿梭载体 | 体液赖(lysine)含量荧光定量检测试剂盒 |
细胞LCK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 鸟嘌呤解离刺激因子样蛋白1抗体 |
麦芽粉β-活性DNS比色法定量检测试剂盒 | 短链脱氢还原酶3抗体 |
组织AMPK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 原钙粘附蛋白β14抗体 |
高质型ECL免疫印迹化学发光溶液 | A型禽流感病毒H7N9 M1蛋白抗体 |
PerCP标记的血型糖蛋白A(CD235a)抗体 | 利钠肽受体C抗体 |
冰冻切片线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRM)测定试剂盒 | Recombinant Human Macrophage inflammatory5癌基因VAV2抗体 |
角蛋白相关蛋白11-1抗体 | G蛋白偶联受体31抗体 |
重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: Macrophage inflammat;10 kDa; 22-113;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。