操作要点：
电泳条件：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
转膜参数：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。
抗体选择：
一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。
二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。
显色方式：ECL化学发光法，预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。
产品概述：
Recombinant Human PRAME（重组人PRAME蛋白）是一种在大肠杆菌中表达的重组蛋白，作为一类重要的“癌-睾丸抗原”，主要用于癌症免疫学研究、T细胞受体（TCR）特异性筛选及免疫疗法药物（如TCR-T）的开发与质量控制1。
产品名称; Recombinant Human PRAME
别名; 4930534P07Rik, Cancer/testis antigen 130, CT130, MAPE, Melanoma antigen preferentially expressed in tumors, OIP 4, OIP-4, OIP4, OPA interacting protein 4, Opa interacting protein OIP4, OPA-interacting protein 4, PRAME, PRAME_HUMAN, Preferentially expressed antigen in melanoma, Preferentially expressed antigen of melanoma, RP23-250F8.3
宿主; E.Coli
表达区间; 321-420
分子量; 31.3 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明：
复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理：
基因克隆：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。
蛋白纯化：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品：
果蝇CG6856-PA抗体 | ras癌基因家族Rab9蛋白抗体 |
蛛毒素受体抗体 | 组织中链脂酰合成酶（ACYL COA SYNTHETASE） |
微管蛋白聚合促进蛋白24 | 细胞总乳酸比色法定量检测试剂盒 |
FGFR1癌基因伴侣蛋白抗体 | 顶体形态刀豆素A凝集素荧光标记（ConA-FITC）染色试剂盒 |
细胞3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）活性酶动力比色法 | 细胞线粒体复合物V蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 |
细菌苯丙脱氨基检测试剂盒 | 乳果糖待测样品处理试剂盒 |
饮料镁离子浓度酶反应光谱法定量检测试剂盒 | 尿苷酰二磷酸葡萄糖焦磷化酶2抗体 |
纯化大鼠肾上腺髓质素（AM）基因重组表达载体（pGEFP-AM） | 多腺苷二磷酸多聚酶抗体(N端) |
组织样品组织C（CATHEPSIN C）活性比色法定量检测试剂盒 | 乙酰辅酶A结合蛋白抗体 |
RNA比色法定量检测试剂盒 | 5号染色体开放阅读框34抗体 |
小鼠抗人CD90单克隆抗体 | 磷酸化蛋白激酶C结合蛋白2抗体 |
动物上皮细胞分离培养试剂盒 | Recombinant Human PRAME白介素17F抗体 |
脊髓性肌萎缩症蛋白Gemin6抗体 | LHX9蛋白抗体 |
重组蛋白生产流程：
通常包括以下几个核心步骤：
基因克隆：首先，科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列（目的基因）。
构建载体：将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中，这个载体就像是一个运输工具，
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主：将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中，这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养：宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养，其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息，开始大量生产目标蛋白。
纯化：通过一系列复杂的生物化学方法（如层析技术），将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来，以获得高纯度的产品。
关键字： PRAME;31.3 kDa; 321-420;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域，利用互联网、数据分析及自动化技术，包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品，截止至2024年5月，西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景，西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力，更加重视本土化，建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活，能快速响应客户需求的产品。