犬腺体病毒1型（犬传染性肝炎病毒）探针法荧光定量PCR试剂盒

犬腺体病毒1型（犬传染性肝炎病毒）探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于TaqMan探针技术，专用于犬腺体病毒1型（CAV-1，即犬传染性肝炎病毒）核酸的定性与定量检测。适用于犬传染性肝炎的临床诊断、流行病学调查及科研监测，具有高灵敏度和特异性，可检测血液、血清、粪便、鼻咽拭子及肝脏组织样本中的病毒核酸。

技术原理与特点

检测原理
针对CAV-1保守基因区域（如衣壳蛋白或DNA聚合酶基因）设计特异性引物及探针，通过实时荧光信号（FAM通道）监测扩增过程，实现病毒核酸的定量分析。

核心优势

高特异性：经生物信息学验证，与犬瘟热病毒、犬细小病毒等无交叉反应。

高灵敏度：最低检测限达5–100 copies/μL。

快速高效：全程约2小时（含核酸提取），优于传统培养法。

操作安全：闭管反应设计，降低污染风险。

试剂盒组成

| 组分 | 规格 | 功能说明 |

| 荧光PCR反应液 | 500–1000 μL | 预混缓冲液及dNTPs |

| 特异性引物/探针混合物 | 100–200 μL | 靶向扩增CAV-1基因片段 |

| 酶混合物 | 48–100 μL | 含热启动DNA聚合酶 |

| 阳性对照（1×10⁸ copies/μL） | 50 μL | 人工合成DNA片段，验证实验有效性 |

| 阴性对照（无菌水） | 50–100 μL | 监控污染 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 样本DNA稀释 |

操作流程

样本处理

样本类型：血液、血清、粪便、鼻咽拭子或肝脏组织。

核酸提取：推荐使用商品化DNA提取试剂盒（如磁珠法），或加热裂解法（100℃ 10分钟离心取上清）。

反应体系配置

体积：20–25 μL（含模板DNA 5 μL）。

对照设置：每批次需包含阴/阳性对照。

扩增程序

预变性：95℃ 10分钟。

循环扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（40–45循环），采集FAM信号。

结果判定

阳性：Ct值≤35且扩增曲线呈S型。

阴性：无Ct值或Ct值>40。

定量分析：通过标准曲线计算病毒载量。

注意事项

生物安全

仅限科研或兽医诊断使用，需在BSL-2实验室操作。

防污染措施

严格分区操作，使用带滤芯枪头及无酶耗材。

储存条件

-20℃避光保存，避免反复冻融（≤10次），有效期12个月。

局限性

检测结果受样本采集、保存及提取方法影响。

基因突变可能导致假阴性；交叉污染可能导致假阳性。

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