柑橘黄龙病菌亚洲种探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 柑橘黄龙病菌亚洲种探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Candidatus Liberibacter asiaticus Probe-based Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5265 |
预期用途
本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光PCR技术，用于柑橘黄龙病菌亚洲种（Candidatus Liberibacter asiaticus）核酸的定性及定量检测。该病原体可导致柑橘黄龙病，表现为叶片黄化、斑驳、枝梢衰弱及果实畸形等症状。本产品适用于科研用途，不用于临床诊断。
规格与成分
探针法qRT-PCR缓冲液：500μL
探针法qRT-PCR酶混合液：100μL
荧光PCR专用模板稀释液：1 mL
特异性引物混合液：100μL（针对柑橘黄龙病菌亚洲种保守基因区域设计）
qRT-PCR探针：50μL（FAM通道标记）
阳性对照：50μL（1×10^8拷贝/μL，无传染性DNA片段）
说明书：1份
储存条件
-20℃避光保存，有效期12个月。避免反复冻融（建议冻融次数少于7次）。
适用仪器
兼容ABI、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad等主流荧光定量PCR仪。
自备材料
无核酸酶的离心管、吸头及PCR反应管
RNA提取试剂（推荐柱式病毒RNA提取试剂盒）
离心机、涡旋振荡器
使用方法
1. 标准曲线制备
将阳性对照进行10倍梯度稀释（10^2–10^7拷贝/μL），标记为2–7号管，冰上保存备用。
2. 样本处理
提取待测样本RNA，建议设置阴性对照（NC，水）和阳性对照（PC，稀释后的阳性对照）。
3. PCR反应体系（20μL）
| 成分 | 样本管（μL） | 阴性对照（μL） | 标准曲线管（μL） |
| qRT-PCR缓冲液 | 10 | 10 | 10 |
| 酶混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 探针 | 1 | 1 | 1 |
| 引物混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 样本RNA/标准品/水 | 5 | 5（水） | 5（标准品） |
4. 扩增程序
逆转录：50℃ 30分钟
预变性：94℃ 10分钟
PCR循环（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM信号）
数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。
定性检测：阴性对照Ct值≥40时，样本Ct值≤35判为阳性。
注意事项
操作需分区进行（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免交叉污染。
阳性对照需最后添加，防止气溶胶污染。
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断或治疗。
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