白蔹探针法PCR鉴定试剂盒 新品

产品用途

用于白蔹（Ampelopsis japonica）的种源性基因检测，仅限科研使用，不可用于临床诊断。

技术原理

基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术，通过探针法检测靶序列：

探针设计：5'端标记荧光报告基团，3'端标记淬灭基团。扩增时Taq酶切割探针，释放荧光信号，通过荧光强度变化定量分析目标DNA。

检测流程：包括反转录（若检测RNA）、PCR扩增和实时荧光信号采集。

产品组成

以50T规格为例，主要成分包括：

试剂一：探针法qRT-PCR缓冲液（500μL）

试剂二：酶混合液（100μL）

试剂三：荧光PCR模板稀释液（1mL）

试剂四：白蔹特异性引物混合液（100μL）

试剂五：荧光探针（50μL）

试剂六：阳性对照（1×10^8拷贝/μL，50μL）

说明书：1份

储存与运输

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

实验步骤

标准曲线制备：

将阳性对照按10倍梯度稀释（10^2~10^7拷贝/μL），用于定量分析。

样本制备：

提取待测样本RNA/DNA，建议设置阴/阳性对照。

PCR反应体系（20μL/反应）：

| 成分 | 体积（μL） |

| qRT-PCR缓冲液 | 10 |

| 酶混合液 | 2 |

| 探针 | 1 |

| 引物混合液 | 2 |

| 模板RNA/DNA | 5 |

反应程序：

逆转录：50℃ 30分钟（若需）

预变性：94℃ 10分钟

扩增循环（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM通道信号）

数据分析

定量检测：根据标准曲线计算样本拷贝数。

定性检测：

Ct值≤35为阳性，≥40为阴性；35~40需复测。

阴性对照Ct值应≥40，阳性对照Ct值≤30。

注意事项

操作需在独立区域进行，避免交叉污染。

自备RNA提取试剂及无核酸酶耗材。

不同试剂盒组分可能略有差异，请以实际产品说明书为准。

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