MCF-7-LUC-GFP-Puro双标记的人乳腺癌细胞
商品属性
产品名称 | MCF-7-LUC-GFP-Puro双标记的人乳腺癌细胞 | 英文名称 | MCF-7-LUC-GFP-Puro |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 贴壁生长 |
货号 | P-X11109 | 细胞生长 | 上皮细胞样 |
标记类型:荧光素酶(LUC)和绿色荧光蛋白(GFP)双标记,含嘌呤霉素(Puro)抗性筛选标记
生长特性:贴壁生长,上皮细胞样形态
组织来源:人组织
培养条件
培养基:推荐使用含10%-20%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基,添加1%青霉素-链霉素(PS)。
培养环境:37℃、5% CO₂恒温培养箱。
血清浓度优化:10%-20%血清浓度可提高细胞生长稳定性和实验重复性。
操作规范标
复苏操作:
冻存管从液氮取出后,立即置于37℃水浴,保持45°角倾斜,避免管口朝向操作者。
每15秒轻柔涡旋震荡,解冻时间控制在90秒内。当仅剩少量冰晶(约5%体积)时移出水浴,以保持细胞最佳存活率。
消化条件:室温下胰酶消化1-3分钟,终止消化后离心重悬。
传代比例:建议1:2至1:3传代,避免过度稀释影响细胞状态。
记稳定性与筛选
细胞已稳定转染LUC-GFP-Puro,但随传代次数增加,荧光强度可能减弱。
维持荧光强度:可定期使用10 μg/mL嘌呤霉素筛选,初始筛选浓度为20 μg/mL。
注意事项
无菌操作:严格避免污染,所有操作需在生物安全柜内完成。
空泡现象:密集培养时可能出现巨大空泡,属正常特性,不影响实验。
冻存建议:使用无血清冻存液,液氮长期保存。
包装规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1 mL冻存管。
运输方式:复苏活细胞(需干冰保温)或冻存管运输,货期通常为一周(特殊细胞除外)。
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关键字: MCF-7-LUC-GFP-Puro双标;人乳腺癌细胞;
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