HOS人骨肉瘤细胞

商品属性

组织来源：人骨组织

细胞类型：贴壁生长，上皮细胞样

肿瘤特性：非肿瘤细胞

培养条件

培养基：

基础培养基：EMEM或DMEM（高糖型，如DMEM-H）

添加成分：10%胎牛血清、1%双抗（青霉素-链霉素）。

培养环境：

温度：37℃

气相：95%空气 + 5% CO₂

湿度：70%-80%。

细胞复苏与传代

1. 复苏步骤：

快速解冻：将冻存管（含1mL细胞悬液）于37℃水浴中摇晃至完全溶解。

离心清洗：加入5mL培养基混匀，1000 rpm离心5分钟，弃上清后重悬于4-6mL新鲜培养基。

初始培养：转移至T25培养瓶或6cm皿中，37℃过夜培养，次日换液并观察密度。

2. 传代步骤（贴壁细胞）：

消化条件：使用0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液，37℃孵育1-2分钟（显微镜下观察细胞变圆后终止）。

终止消化：加入含10%血清的培养基（比例≥1:3消化液体积）终止反应。

离心与分瓶：1200 rpm离心3分钟，弃上清后按1:3至1:8比例分瓶传代。

冻存条件

冻存液配方：90% FBS + 10% DMSO（现配现用）。

储存方式：液氮长期保存（建议定期复苏检测活性）。

注意事项

质量控制：

定期检测支原体污染。

传代时细胞密度需达80%-90%，避免过度消化。

运输与接收：

干冰运输（冻存管）或复苏后活细胞运输（需确认协议）。

培养周期：建议每2-3天换液，依据培养基颜色（pH变化）调整频次。

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