HUVEC+GFP人脐静脉内皮细胞永生化+GFP

商品属性

规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管

用途：仅供科研使用（如免疫荧光鉴定、内皮修复研究等），不可用于临床诊断或治疗。

生物安全等级：1级

细胞特性

来源：人脐带内皮组织，经慢病毒转染稳定携带GFP基因。

形态：贴壁生长，上皮细胞样或内皮细胞样。

荧光特性：GFP荧光强度可能随传代次数增加而减弱，需定期嘌呤霉素筛选维持（建议传3代后冻存留种再筛选）。

纯度与安全性：支原体、细菌、酵母及真菌检测阴性。

致瘤性：在半固体培养基中形成克隆，但在免疫yi制小鼠中不形成肿瘤。

培养条件

培养基配方：

基础培养基（如Ham's F-12K）93%

胎牛血清（FBS）5%~10%

内皮细胞添加剂（如Heparin 0.1mg/ml + ECGs 0.03-0.05mg/ml）1%

青霉素/链霉素（P/S）1%

培养环境：37℃、5% CO₂、湿度70%~80%。

传代比例：1:2至1:4，换液频率2~3次/周，倍增时间约23.5小时。

细胞处理指南

复苏步骤：

37℃水浴快速解冻冻存管，将细胞悬液转移至含4~6mL完全培养基的离心管中，1000 RPM离心3~5分钟。

弃上清，用新鲜培养基重悬后接种至T25瓶，37℃培养过夜后观察密度。

传代操作：

细胞密度达80%~90%时，用胰酶消化后按比例分瓶。

冻存方法：

冻存液配方：90% FBS + 10% DMSO（现配现用）。

GFP荧光维持筛选方案

筛选条件：

初始嘌呤霉素浓度1μg/mL，逐步递增至5μg/mL（每阶段观察细胞漂浮情况）。

若漂浮细胞＞60%，暂停筛选并恢复常规培养至80%密度后继续。

终止标准：细胞在5μg/mL嘌呤霉素下正常增殖即可停止筛选。

运输与保存

运输方式：干冰运输或复苏后活细胞发送。

保存建议：液氮或-80℃长期保存，避免反复冻融。

注意事项

产品可能存在批次差异，以实际出库信息为准。

实验前需通过免疫荧光验证GFP表达及细胞状态。

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