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无血清/无蛋白细胞冻存液

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K1012

中文名称：无血清/无蛋白细胞冻存液

存储条件：4℃，1年

产品活性：MCE 无血清无蛋白细胞冻存液是一种非程序性即用型细胞冻存液。该产品既适用于常规哺乳动物细胞的冻存，也适用于无血清培养细胞的冻存。

生物活性：产品既适用于常规哺乳动物细胞的冻存，也适用于无血清培养细胞的冻存。本品使用方便，即取即用，冻存过程中无需繁琐费时的程序性降温步骤，可重悬细胞后直接进行冻存。

描述及优势：

产品既适用于常规哺乳动物细胞的冻存，也适用于无血清培养细胞的冻存。本品使用方便，即取即用，冻存过程中无需繁琐费时的程序性降温步骤，可重悬细胞后直接进行冻存。

操作流程：1. 细胞冻存 建议冻存处于对数生长期的细胞，有助于提高复苏细胞存活率。 1.1. 细胞消化：对于贴壁细胞，采用无菌 PBS 洗涤两次后添加适量胰酶将其消化成单细胞悬液；胰酶消化贴壁细胞后最好让细胞在完全培养基中慢慢复苏。整个过程要小心操作，避免人为损伤细胞。悬浮细胞直接进行 1.2 步骤。 注：切记不要过度消化细胞，以消化至刚好能把细胞吹打下来为最佳。否则会影响细胞复苏时的存活率。 1.2. 细胞收集：收集细胞悬液于离心管中，500 g、4℃ 离心 3-5 min。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。 注：尽可能去除上清，以免在下一步稀释细胞冻存液。 1.3. 细胞重悬：向细胞沉淀中加入适量 MCE 无血清无蛋白细胞冻存液，调整细胞浓度至 1 × 106-107 cells/mL。轻轻吹匀至单细胞悬液。整个过程冰上操作，以避免保护剂对细胞造成损伤。 1.4. 细胞分装：将制备好的细胞悬液分装于已标记好的细胞冻存管中，做好密封措施，防止染菌。 1.5. 细胞冻存：直接将含细胞悬液的冻存管放入 -80℃ 冰箱中，24 h 后移入液氮长期保存。 2. 细胞复苏 实验开始前先 37℃ 预热细胞完全培养基。 2.1. 细胞解冻：取出冻存管，并立即放入 37℃ 水浴锅中快速解冻。水浴过程中保证冻存管盖子盖紧，轻轻摇动管子使其融化完全。 2.2. 细胞复苏：待冻存管细胞完全融化后，用 75% 酒精棉球擦拭外管，并立即向冻存管中加入少量完全培养基，轻轻吹匀至细胞悬液；再将细胞悬液移入已含有 5-10 mL 完全培养基的离心管中，充分混合均匀。 2.3. 细胞收集：500 g、4℃ 离心 3-5 min。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。 2.4. 细胞培养：向细胞沉淀中加入适量新鲜细胞培养基，充分混合均匀；镜检后，根据实验需求进行细胞培养。

详情参考：www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/serum-protein-free-cell-freezing-medium.html