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Annexin V-mCherry 细胞凋亡检测试剂盒
品牌:MedChemExpress (MCE)
货号:HY-K1076
中文名称:Annexin V-mCherry 细胞凋亡检测试剂盒
存储条件:-20°C,1年避光保存,避免反复冻融
产品活性:Annexin V-mCherry 细胞凋亡检测试剂盒可方便、快捷的检测细胞凋亡。经 Annexin V-mCherry 染色后,正常细胞基本无荧光,凋亡细胞及坏死细胞呈红色荧光。
生物活性:MCE Annexin V-mCherry 细胞凋亡检测试剂盒采用红色荧光蛋白 mCherry 标记的重组人 Annexin V 来检测细胞凋亡。在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine, PS)位于细胞膜内侧;细胞凋亡早期,PS 会外翻到细胞膜外侧。Annexin V(膜联蛋白 V)是一种 Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,可与 PS 特异性结合,因此 Annexin V 常作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。Annexin V 经 mCherry 标记后可发红色荧光,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。与藻红蛋白(Phycoerythrin, PE)相比,mCherry 标记的Annexin V 的激发光谱更窄,更适合与其他绿色荧光一起检测。经 Annexin V-mCherry 染色后,正常细胞基本无荧光,凋亡细胞及坏死细胞呈红色荧光。
描述及优势:
MCE Annexin V-mCherry 细胞凋亡检测试剂盒采用红色荧光蛋白 mCherry 标记的重组人 Annexin V 来检测细胞凋亡。在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine, PS)位于细胞膜内侧;细胞凋亡早期,PS 会外翻到细胞膜外侧。Annexin V(膜联蛋白 V)是一种 Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,可与 PS 特异性结合,因此 Annexin V 常作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。Annexin V 经 mCherry 标记后可发红色荧光,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。与藻红蛋白(Phycoerythrin, PE)相比,mCherry 标记的Annexin V 的激发光谱更窄,更适合与其他绿色荧光一起检测。经 Annexin V-mCherry 染色后,正常细胞基本无荧光,凋亡细胞及坏死细胞呈红色荧光。
操作流程:1. 收集 1-5 × 105 个细胞。 悬浮细胞:1000 g 离心 5 min,弃去上清。加入 1 mL 预冷的 PBS 轻轻重悬细胞沉淀,1000 g 离心 5 min,弃去上清,保留细胞沉淀。 贴壁细胞:小心吸取细胞培养液保存备用。加入 PBS 洗涤后,加入适量胰酶消化液(尽量不含 EDTA,以免影响 Annexin V 和 PS 的结合)消化细胞。加入前面收集的培养液,轻轻吹打细胞,制成单细胞悬液,1000 g 离心 5 min,弃去上清。加入 1 mL 预冷的 PBS 轻轻重悬细胞沉淀,1000 g 离心 5 min,弃去上清,保留细胞沉淀。 注:建议胰酶消化液不含 EDTA。 2. 加入 195 μL Binding Buffer。 3. 加入 5 μL Annexin V-mCherry。可根据实际情况调整 Annexin V-mCherry 的使用量。 4. 室温下避光孵育 10-20 min。孵育过程中可轻轻颠倒数次以加强染色效果。 5. 适用流式细胞仪或荧光显微镜观察 (Ex = 587 nm; Em = 610 nm)。
详情参考:www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/mce-annexin-v-mcherry-apoptosis-detection-kit.html