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品牌:MedChemExpress (MCE)
货号:HY-K2108
产品活性:MCE HOLO 人白介素-17F (IL-17F) 检测试剂盒是一种基于双抗体夹心的均相发光法定量检测缓冲液、细胞培养上清或血清等生物样本中人 IL-17F 浓度的试剂盒。
描述及优势:IL-17F 是一种由活化的 T 细胞、肥大细胞和嗜碱性粒细胞等炎症细胞分泌的细胞因子,可以以同型二聚体或与 IL17A 形成异二聚体分泌。作为 IL-17 家族 (IL-17A - IL-17F) 的成员,IL-17F 参与过敏性气道炎症,可诱导支气管上皮细胞、静脉内皮细胞、成纤维细胞和嗜酸性粒细胞中产生多种细胞因子、趋化因子和粘附分子的表达。此外,IL-17F 还刺激其他促炎细胞因子,如 TNF α、IL-1 β、IL-6 和 IL-8 的诱导性表达。 MCE HOLO 人白介素-17F (IL-17F) 检测试剂盒是一种基于双抗体夹心的均相发光法定量检测缓冲液、细胞培养上清或血清等生物样本中人 IL-17F 浓度的试剂盒。 检测原理为:将 IL-17F 特异性抗体 1 (F 结合物标记)、IL-17F 特异性抗体 2(生物素标记)、受体微球(F 结合物交联)、待测样本混合孵育,形成双抗体夹心的免疫复合物(抗体 1 - 样本 - 抗体 2)。免疫复合物再与供体磁珠(链霉亲和素交联)共孵育形成发光复合物,实现两种微球间距 200 nm 超出单线态氧的传递距离,受体微球均不产生发射光。 MCE HOLO 人白介素-17F (IL-17F) 检测试剂盒具有如下特点: 1. 操作简便:实验简单快速,无需清洗、分离操作,匹配自动化仪器; 2. 检测范围宽:动态检测范围 0 - 300,000 pg/mL,检测线性范围 3.34 - 30,000 pg/mL; 3. 灵敏度高:样本用量小灵敏度高,特异性强,可实现高通量检测; 4. 兼容性:适用于细胞培养上清、缓冲液和血清等天然样本。
操作流程:样品预处理 若待测样本检测浓度超过试剂盒检测上限,建议适当稀释后检测。 1. 细胞培养上清:细胞培养上清液 1,000 × g 离心 10 min,收集上清液。 注:细胞培养液中应至少添加 1% FBS 或 0.1% BSA。 注:细胞培养液中应至少添加 1% FBS 或 0.1% BSA。 2. 血清:按常规方案收集血清样本即可。 注:待测样本为血清时,建议选择阴性血清复溶/稀释标准品,其中阴性血清中人 IL-17F 含量应低于检测空白限(空白限浓度见附录)。 标准品准备 将 IL-17F 标准品(冻干粉)用 50 μL 去离子水复溶,配制成 3 μg/mL 的母液,然后用稀释缓冲液将母液稀释成系列梯度浓度溶液。 检测 根据检测类型以下两种方案选一即可。 方案一(适用于缓冲液、DMEM 和胎牛血清等大部分常规培养体系中 IL-17F 浓度检测) 1. 双抗体预混液制备:20 μL A + 20 μL B + 20 μL C ,混匀待用。 注:建议双抗体预混液制备后在 1 h 内使用完毕。 2. 免疫复合物制备:将 10 μL 标准品/待测样品加入到上述双抗体预混液中,混匀。37°C 孵育 15 min 或室温孵育 60 min。 注:孵育过程建议微孔板盖盖或覆膜,防止液体挥发。 3. 发光复合物制备:在绿光或避光环境下,将 50 μL D. 供体微球(链霉亲和素交联)加入到上述免疫复合物体系中,37°C 孵育 10 min 或室温孵育 30 min。 注:a. 前后两次孵育温度需保持一致。 b. D. 供体微球(链霉亲和素交联)对光敏感,建议避光(光照度 c. 孵育过程建议微孔板盖盖或覆膜,防止液体挥发。 4. 检测:将发光复合物置于均相化学发光仪或含 Alpha 模块的多功能酶标仪中进行仪器读数 RLU。 5. 标准曲线绘制:以 IL-17F 浓度 (pg/mL) 为横坐标,RLU 为纵坐标绘制标准曲线。 注:建议每次检测重新绘制标准曲线,标准品每个浓度做 2 - 3 个复孔。 6. 计算:根据标准曲线计算出待测样品中 IL-17F 浓度。 方案二(适用于 RPMI 培养体系中 IL-17F 浓度检测) 1. 双抗体预混液制备:在绿光或避光环境下,20 μL A + 20 μL B + 20 μL D,充分混匀,室温孵育 30 min。 注:a. D. 供体微球(链霉亲和素交联)对光敏感,建议避光(光照度 b. 孵育过程建议微孔板盖盖或覆膜,防止液体挥发。 2. 免疫复合物制备:在绿光或避光环境下,将 10 μL 标准品/待测样品加入到上述预混液中,37°C 孵育 15 min。 注:孵育过程建议微孔板盖盖或覆膜,防止液体挥发。 3. 发光复合物制备:在绿光或避光环境下,加入 20 μL C.受体微球(F 结合物交联)到上述预混液中,37°C 孵育 10 min。 注:孵育过程建议微孔板盖盖或覆膜,防止液体挥发。 4. 检测:将发光复合物置于均相化学发光仪或含 Alpha 模块的多功能酶标仪中进行仪器读数 RLU。 5. 标准曲线绘制:以 IL-17F 浓度 (pg/mL) 为横坐标,RLU 为纵坐标绘制标准曲线。 注:建议每次检测重新绘制标准曲线,标准品每个浓度做 2 - 3 个复孔。 6. 根据标准曲线计算出待测样品中 IL-17F 浓度。
详情参考:www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/holo-human-interleukin-17f-il-17f-detection-kit.html
品牌介绍:• MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库,我们致力于为全球科研客户提供前沿最全的高品质小分子活性化合物;• 50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域;• 产品种类涵盖各种重组蛋白,多肽,常用试剂盒 ,更有 PROTAC、ADC 等特色产品,广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目;• 提供虚拟筛选,离子通道筛选,代谢组学分析检测分析,药物筛选等专业技术服务;• 设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系;• 提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告,确保产品的高纯度、高品质;• 产品的生物活性多经各国客户实验验证;• Nature, Cell, Science 等多种顶级期刊及制药专利收录了MCE客户的科研成果;• 专业团队跟踪最新的制药及生命科学研究进展,为您提供全球最新的活性化合物;• 与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。
MCE(MedChemExpress)
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