荧光素酶标记的人肝癌细胞;Hep3B2.1-7-Luc
产品信息:

1. 细胞基本档案
特征维度 详细信息
亲本来源 人肝癌细胞 (Hep3B2.1-7)
修饰方式 慢病毒转染携带 Luc 基因
标记物 稳定表达萤火虫荧光素酶
抗性筛选 嘌呤霉素 (Puromycin)
种属/性别 人 (男性,8岁黑人儿童)
组织来源 肝脏
生长特性 贴壁生长,上皮细胞样
特殊背景 HBV阳性 (含有乙肝病毒基因组)
产品名称 | 荧光素酶标记的人肝癌细胞;Hep3B2.1-7-Luc | 英文名称 | Hep3B2.1-7-Luc:Hep3B217Luc |
货号 | AXB10576 | 生长特性 | 贴壁生长 |
培养操作手册

为什么要选择Hep3B2.1-7-Luc?
HBV研究模型: 这是Hep3B系列细胞最大的特点——它含有完整的乙肝病毒(HBV)基因组。如果你的研究涉及乙肝相关性肝癌、HBV复制机制或抗病毒药物筛选,它是比HepG2更合适的选择。
活体动态监测: 利用Luc标记,你可以通过活体成像系统(IVIS)实时监测肝癌细胞在小鼠体内的成瘤过程、肺转移或骨转移情况,无需处死动物,大大减少了实验误差和成本。
药物敏感性测试: 作为p53缺失的肝癌细胞系,它常用于评估靶向药物或化疗药物(如索拉非尼)对肝癌细胞的杀伤效果。
培养操作手册

基础培养条件 (争议点解析)
关于Hep3B的培养基选择,不同实验室和供应商略有差异,我为你总结了两种主流方案:
方案一(主流推荐): MEM (Minimum Essential Medium) + 10% FBS + 1% 双抗。
补充: 部分实验室会在MEM中额外添加 1% 非必需氨基酸 (NEAA)、1% L-谷氨酰胺 和 1% 丙酮酸钠,这能更好地维持其上皮样形态。
方案二(部分供应商推荐): DMEM (高糖) + 10% FBS + 1% 双抗。
注意: 有观点认为高糖DMEM可能导致细胞形态改变,建议优先参考你购买细胞时的说明书。若无特殊说明,MEM是更稳妥的选择。
环境: 37℃,5% CO,饱和湿度培养箱。
传代操作 (关键难点:贴壁较弱)
Hep3B细胞属于上皮样贴壁细胞,但它的贴壁能力相对较弱,非常容易在清洗或移动过程中脱落。这是新手最容易出错的地方!
观察: 细胞密度达到 80%-90% 时进行传代(不要等完全长满,否则容易堆积死亡)。
清洗(轻柔): 弃去旧培养基,用预热的PBS轻轻润洗一次。动作一定要轻,防止把细胞冲下来扔掉。
消化: 加入适量的 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-EDTA),放入培养箱消化 1-3 分钟。
技巧: 由于它贴壁弱,消化时间通常比HeLa等细胞短。显微镜下看到细胞间隙变大、微微变圆即可。
终止: 加入含血清的完全培养基终止消化。
吹打(轻柔): 轻柔吹打混匀,避免产生过多气泡损伤细胞。
离心: 1000 rpm 离心 3-5 分钟。
重悬: 弃上清,加入新鲜完全培养基重悬。
分瓶: 按 1:2 至 1:3 的比例传代。
收货处理 (如果是刚复苏或常温运输)
常温运输(T25瓶): 收到后先不要打开,75%酒精消毒瓶壁,在培养箱中静置 1-2小时 让细胞适应环境,然后在显微镜下观察。如果密度在60%以下,直接换液培养;如果在70%以上,直接传代。
干冰运输(冻存管): 标准快速复苏流程(37℃水浴摇动融化),离心后重悬接种。
Hep3B2.1-7-Luc 特有注意事项

抗生素维持(关键):
为了维持Luc基因的稳定表达,防止长期培养后荧光丢失,必须定期使用嘌呤霉素(Puromycin)进行筛选。
建议浓度: 平时培养维持浓度通常为 1.0 μg/mL 左右(具体视构建时的筛选浓度而定)。如果不加压,荧光信号会随着传代次数增加而逐渐减弱。
生物安全等级:
由于该细胞系含有乙肝病毒基因组(HBV DNA),虽然它不产生完整的感染性病毒颗粒,但为了安全起见,建议在BSL-2(二级生物安全)实验室条件下操作,并按有潜在生物危害性物质处理废弃物。
STR鉴定:
建议定期进行STR鉴定,确保细胞身份正宗,且与数据库匹配。
公司正在出售的产品:
Rhesus antibody Rh FRMD1 FRMD1蛋白抗体 规格 0.2ml | MRPS4 英文名称: 线粒体核糖体蛋白S4抗体 0.1ml |
ARL11 英文名称: ADP核糖基化因子样11抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh SSX5 滑膜X断点蛋白5抗体 规格 0.2ml |
Anti-Phospho-MKP1 (Ser359)/FITC 荧光素标记0酸化原活化蛋白激酶0酸酶-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-phospho-Smad2(Ser465) 0酸化Smad2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
Rhesus antibody Rh UBE1/E1 Ubiquitin Activating Enzyme 泛素激活酶E1抗体 规格 0.2ml | APOA1BP/AI-BP 英文名称: 载脂蛋白A1结合蛋白抗体抗体 0.2ml |
Rhesus antibody Rh ELYS 转录因子ELYS蛋白抗体 规格 0.2ml | CD62L 英文名称: L选择素抗体 0.1ml |
MAG1 英文名称: 转移相关蛋白抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh phospho-KCND2/Kv4.2(Thr602) 0酸化电压门控性通道蛋白Kv4.2抗体 规格 0.1ml |
ADAMTS12 英文名称: 整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体 0.2ml | Anti-PEPT2 /FITC 荧光素标记肠道肽转运蛋白2/小肽转运蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
Anti-Bax(phospho Ser184) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠等0酸化Bax抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 基质金属蛋白酶-7抗体 Anti-MMP-7 0.1ml |
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗豚鼠IgG 规格 0.1ml | 荧光素酶标记的人肝癌细胞;Hep3B2.1-7-LucAGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor) 晚期糖基化终末产物特异性受体(抗原) 0.5mg |
Anti-CCR-2B 细胞表面趋化因子受体2B抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh TORC1/CRTC1 环腺苷酸应答元件结合蛋白转录共激活因子TORC1抗体 规格 0.2ml |
注意事项与应用
无菌操作:必须严格无菌无毒,避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求:需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等,动物细胞还需血清。
抗生素使用:可添加双抗或三抗预防污染,但长期培养不建议持续使用,以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具,可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
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