产品信息：
该细胞系是在经典的 HCT-15 细胞（人结直肠腺癌细胞）基础上，通过基因工程手段稳定转染了荧光素酶（Luciferase, Luc）报告基因。它保留了亲本细胞的生物学特性，同时具备了生物发光能力，是结直肠癌肿瘤生长、转移及药物疗效评价研究中的重要工具。
细胞基本信息
种属来源：人（Homo sapiens）
供体信息：男性，Dukes' C期结直肠腺癌患者
组织来源：结直肠腺癌（Colorectal Adenocarcinoma）
标记基因：荧光素酶（Luciferase），通常伴随嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因。
细胞形态：上皮细胞样
生长特性：贴壁生长
基因特征：CSAp阴性 (CSAp-)，角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。
产品名称 | 荧光素酶标记的人结直肠腺癌上皮细胞;HCT-15-Luc | 英文名称 | HCT-15-Luc：HCT15Luc |
货号 | AXB10590 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
细胞特性与应用
特征维度 详细描述
背景简介 HCT-15 细胞分离自男性 Dukes' C 期结直肠腺癌患者的肿瘤组织，具有较强的致瘤性。
荧光特性 稳定表达荧光素酶，加入底物 D-luciferin 后可产生生物发光，适用于活体成像（In Vivo Imaging）和体外药敏实验。
筛选维持 为了维持荧光素酶基因的稳定表达，通常需要在培养基中添加嘌呤霉素（Puromycin）进行筛选（具体浓度需参考供应商说明书，通常为 1-10 μg/mL）。
主要应用 1. 结直肠癌肿瘤生长与转移示踪。
抗肿瘤药物筛选与药效评价。
甘油转运系统及癌症增殖、凋亡研究。
推荐培养体系
基础培养基：RPMI-1640
血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)
双抗添加：1% 青霉素-链霉素 (P/S)
筛选维持：Puromycin (嘌呤霉素)，推荐浓度通常为 1-10 μg/mL（具体浓度请参考购买时的说明书）。
培养环境：
温度：37℃
气体环境：95% 空气 + 5% CO
湿度：维持培养箱内湿度 >90%。
详细培养操作指南
1. 细胞复苏 (Thawing)
预热：将水浴锅调至 37℃，预热完全培养基。
解冻：从液氮中取出冻存管，迅速放入 37℃ 水浴中，轻轻摇晃，使其在 1-2 分钟内 快速融化。
转移：用 75% 酒精擦拭冻存管外壁消毒，转入超净台。
稀释：将细胞悬液缓慢加入含有 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中（稀释 DMSO 毒性）。
离心：1000 rpm (约 250g) 离心 3-5 分钟。
接种：弃上清，加入新鲜完全培养基（含嘌呤霉素）重悬，接种至 T25 培养瓶中，放入培养箱静置培养。
细胞传代 (Passage)
HCT-15-Luc 为贴壁细胞。
观察：当细胞融合度达到 80%-90% 时进行传代。
清洗：弃去旧培养基，用不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液润洗细胞 1 次。
消化：加入适量消化液（0.25% Trypsin-0.02% EDTA），以覆盖瓶底为宜。
镜下观察：置于 37℃ 培养箱中消化 1-3 分钟，在显微镜下观察，待细胞大部分变圆并脱落时，迅速拿回操作台。
终止：加入含血清的完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀。
离心：1000 rpm 离心 5 分钟。
重悬与分瓶：弃上清，加入新鲜完全培养基（含嘌呤霉素）重悬，按 1:2 至 1:3 的比例进行分瓶传代。
细胞冻存 (Freezing)
状态选择：选择对数生长期、活力好、形态佳的细胞。
计数：消化收集细胞，离心后重悬，进行细胞计数。
冻存液：推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用无血清冻存液。
密度：调整细胞密度至 cells/mL。
程序降温：分装入冻存管，使用程序降温盒（-80℃ 过夜），然后转入液氮罐长期保存。
关键注意事项
荧光维持（重点）：HCT-15-Luc 细胞在长期传代过程中，荧光素酶的表达可能会丢失。因此，必须在平时的培养基中添加筛选抗生素（嘌呤霉素）以维持压力。若发现荧光明显变弱，可进行短期的高浓度抗生素筛选。
运输脱落：HCT-15 细胞贴壁相对较弱，在运输过程中容易发生脱落。若收到细胞发现瓶底有大量漂浮细胞，属正常现象。请将瓶内液体转移至离心管，离心（1000 rpm, 5 min）收集细胞，弃上清，用 PBS 清洗一次，再用完全培养基重悬后接种回培养瓶中。
无菌操作：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌操作。
支原体检测：建议定期检测支原体，确保细胞无污染。
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细胞类型与特性原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。
细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。
细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。
根据生长方式分为：
贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。
悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。
半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。
关键字： HCT-15-Luc;荧光素酶标记的人结直肠腺癌上皮细胞;贴壁细胞;
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